目的 研究HIV感染相关的人血浆糖蛋白质组变化,筛选新的抗病毒蛋白质或药物靶标.方法 采用亲和纯化法去除AIDS患者(n=10)和健康对照(n=20)血浆中的白蛋白和免疫球蛋白,富集低丰度蛋白质.双向凝胶电泳(2-DE)分离富集的蛋白质,糖基化试剂盒染色,构建AIDS患者血浆糖基化蛋白二维凝胶电泳图谱,ImageMaster软件分析表达差异的糖蛋白,并进行质谱鉴定.对去除高丰度蛋白质的HIV和健康对照血浆进行PNGase F酶解,使糖蛋白去糖基化,二维凝胶电泳结合ImageMaster图像分析比较酶解后两类样品的差异蛋白质.差异糖蛋白经液相色谱串联高容量离子阱质谱(HCT)分析鉴定.结果 经试剂盒处理,成功去除了血浆中高丰度的白蛋白和球蛋白,富集了低丰度蛋白质,获得HIV阳性感染者和健康对照血浆糖蛋白的二维凝胶电泳图谱,经PNGase F酶解,使糖蛋白去糖基化,经液相色谱质谱分析,鉴定了13个差异糖基化蛋白质点,包括α1-抗胰蛋白酶前体蛋白、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N1等.结论 筛选到可能与HIV感染相关的糖蛋白,如a1-抗胰蛋白酶前体蛋白等,为了解HIV感染机制及新的抗病毒药物靶标分子的筛选提供了帮助.
作者:贾小芳;陈军;马芳;姚亚敏;卢洪洲;张丽军
来源:中华传染病杂志 2011 年 29卷 4期