目的 探讨亚低温治疗对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后海马区微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1表达的影响. 方法 将60只成年健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI常温组和亚低温治疗组(31 ~ 33℃),每组20只.采用Marmarou法建立大鼠TBI模型,给予常温或亚低温干预4h.各组大鼠于6,12,24及48 h断头取脑,免疫荧光双标法检测LC3与神经元特异性核蛋白(NeuN)、LC3与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的共定位表达,Western blot法检测海马区LC3、Beclin-1和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的蛋白表达. 结果 (1)激光共聚焦扫描显微镜观测到LC3与NeuN(或p-mTOR)的共定位表达,红色荧光与绿色荧光大部分重合.(2)与假手术组比较,TBI常温组LC3、Beclin-1蛋白表达明显增加(P<0.05),两者6h开始增加,24 h达高峰,48 h回落,但仍高于假手术组水平;而p-mTOR蛋白表达量明显减少(P<0.05),于6h开始减少,12 h达最低,24 h及48 h回升,但仍低于假手术组水平.(3)与TBI常温组比较,亚低温治疗组各时相点LC3、Beclin-1表达显著下调(P<0.05),同时p-mTOR蛋白表达量上调(p<0.05). 结论 亚低温可通过p-mTOR信号通路抑制TB1后海马区神经元自噬,进而起到一定的脑保护作用.
作者:张坤;张宏义;王东春;孙立倩;祁大勇;周洪霞
来源:中华创伤杂志 2016 年 32卷 2期