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目的 探讨灌注培养对骨髓基质干细胞(BMSCs)在大段材料上增殖与分布的影响.方法 在大段多孔磷酸三钙材料上种植转染了增强型绿色荧光蛋白基因的大鼠BMSCs(eGFP-BMSCs),分别采用灌注式生物反应器(实验组)和静止培养法(对照组)进行培养.培养7、28 d行扫描电镜观察;培养7、14 d行荧光显微镜观察;动态临测葡萄糖日耗量;培养7、14、28 d测定支架上各层细胞的数量,观察eGFP-BMSCs在支架上的增殖与分布情况.结果扫描电镜和荧光显微镜下观察发现各时间点实验组eGFP-BMSCs均可在支架边缘和内部分布与增殖,而对照组细胞仅能在支架边缘分布与增殖.两组葡萄糖日耗量均随着培养时间的延长而增加,培养28 d时实验组葡萄糖日耗量[(36.33±3.14)mg/d]是对照组[(9.82±1.33)mg/d]的3.7倍,两组分别于20、15 d进入平台期.实验组培养7、28 d时支架各层细胞数量差异无统计学意义(P>0.05),14 d时各层细胞数量的若异有统计学意义(P<0.05);而对照组各时间点支架各层细胞的数量差异均有统计学意义(P<0.05).结论灌注培养法能促进BMSCs在大段多孔材料上增殖,并能使其在大段材料上均匀分布.

作者:王磊;李方国;张鑫鑫;金丹;江汕;郭小磊;姜晓锐;裴国献

来源:中华创伤骨科杂志 2011 年 13卷 5期

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作者:
王磊;李方国;张鑫鑫;金丹;江汕;郭小磊;姜晓锐;裴国献
来源:
中华创伤骨科杂志 2011 年 13卷 5期
标签:
骨髓细胞 生物反应器 细胞培养技术 组织工程 Bone marrow cells Bioreactor Cell culture techniques Tissue engineering
目的 探讨灌注培养对骨髓基质干细胞(BMSCs)在大段材料上增殖与分布的影响.方法 在大段多孔磷酸三钙材料上种植转染了增强型绿色荧光蛋白基因的大鼠BMSCs(eGFP-BMSCs),分别采用灌注式生物反应器(实验组)和静止培养法(对照组)进行培养.培养7、28 d行扫描电镜观察;培养7、14 d行荧光显微镜观察;动态临测葡萄糖日耗量;培养7、14、28 d测定支架上各层细胞的数量,观察eGFP-BMSCs在支架上的增殖与分布情况.结果扫描电镜和荧光显微镜下观察发现各时间点实验组eGFP-BMSCs均可在支架边缘和内部分布与增殖,而对照组细胞仅能在支架边缘分布与增殖.两组葡萄糖日耗量均随着培养时间的延长而增加,培养28 d时实验组葡萄糖日耗量[(36.33±3.14)mg/d]是对照组[(9.82±1.33)mg/d]的3.7倍,两组分别于20、15 d进入平台期.实验组培养7、28 d时支架各层细胞数量差异无统计学意义(P>0.05),14 d时各层细胞数量的若异有统计学意义(P<0.05);而对照组各时间点支架各层细胞的数量差异均有统计学意义(P<0.05).结论灌注培养法能促进BMSCs在大段多孔材料上增殖,并能使其在大段材料上均匀分布.