目的 探讨芬戈莫德(FTY720)对破骨细胞的1-磷酸鞘氨醇(S1P)信号通路功能的作用. 方法 利用地塞米松和1α,25-二羟维生素[1 α,25-(OH)2VitD3]将RAW264.7细胞诱导成破骨细胞,诱导成功后利用反转录聚合酶链反应检测诱导破骨细胞上1-磷酸鞘氨醇受体1(S1PR1)、S1PR2、S1PR3、S1PR4、S 1PR5表达水平的差异,再设置实验组(将400 ng/mL的FTY720-P作用于破骨细胞)和对照组(对照组培养基中仅加入溶解剂),在基因及蛋白水平检测S1P通路下游细胞外信号调节激酶1(ERK1)、caspase9、蛋白激酶C(PKC)的mRNA的表达,并检测与骨重建密切相关的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA表达.结果 成功利用地塞米松和1α,25-(0H)2VitD3将RAW264.7细胞诱导成为破骨细胞,并利用抗酒石酸酸性磷酸酶染色鉴定;诱导成功后的破骨细胞上S1PR1相较于其他S1PR亚型呈高表达.培养48 h后,与对照组比较,实验组的蛋白激酶C mRNA的相对表达量减少,BMP-2 mRNA和TGF-β31 mRNA的相对表达量增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).而两组间ERK1和caspase9 mRNA的相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 FTY720-P能通过影响破骨细胞上S1P信号通路,主要是通过结合S1PR1影响其下游PKC信号的表达,并促进破骨细胞上BMP-2和TGF-β1

作者：郑力彬；黄东

来源：中华创伤骨科杂志 2018 年 20卷 10期