目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂Gefitinib对大鼠骨内膜来源干细胞(EDSCs)增殖及成骨分化的影响.方法 10只健康雄性4周龄SD大鼠随机分为实验组和对照组( n=5 ) ,实验组予以EGFR信号通路抑制剂Gefitinib 100 mg/kg·d灌胃,对照组予以等剂量的甲基纤维素灌胃;术后1周取双侧股骨及胫骨,分别分离提取骨髓间充质干细胞(BMSCs)和EDSCs进行体外增殖克隆,通过流式细胞术鉴定第3代( P3 )细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45;溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,聚合酶链反应检测细胞周期抑制因子相关基因(p15、p16、p21、p27)的表达.成骨诱导14 d后行碱性磷酸酶(ALP)染色,成骨分化21 d后行von Kossa染色,并提取mRNA做实时定量聚合酶链反应检测对比成骨分化相关基因(osteocalcin、bsp、runx2、osterix)的表达.结果 EDSCs与BMSCs的CD29、CD44均呈阳性表达,CD34、CD45均呈阴性表达.Gefitinib阻断EGFR信号通路后,BrdU检测发现其对BMSCs的抑制(11.15
作者:兰生辉;曾文波;陈美玲;袁功武;刘曦明
来源:中华创伤骨科杂志 2018 年 20卷 12期