目的观察生存素反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynuclecotide,ASODN)诱导人喉癌细胞系Hep2凋亡的作用及对喉癌动物模型抑瘤率的影响,以探讨反义技术选择性封闭目的基因表达进而实现抗肿瘤的作用,为喉癌的基因治疗提供新思路.方法用脂质体Lipofectamine TM2000将反义寡核苷酸生存素片段导入人喉癌细胞系Hep2,通过测定细胞增殖的四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,TMM]法检测转染后72 h内的细胞生长情况;转染48 h后逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测生存素基因表达,Western Blot检测蛋白表达;同时细胞凋亡原位检测(terminal deoxynucleotide mediated nick end labeling,TUNEL)法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况.Hep2细胞接种于32只裸鼠,分组给予Lipo-ASODN进行治疗,2周后评价其抑瘤率.结果 MTT实验显示Lipo-ASODN组浓度为1.0 μmol/L和2.0 μmol/L 时细胞生长曲线逐渐降低,72 h细胞抑制率可达52.5
作者:项丞;刘伟松;贾深汕
来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2006 年 41卷 1期