目的 探讨急性缺氧对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cell,SGC)外向钾通道电流的影响.方法 分离并酶解出生l~3 d Sprague Dawley (SD)大鼠SGC,37℃培养8h获得贴壁牢固的原代细胞,在室温条件下(22 ~25℃)通过多管灌流给药系统持续给予无糖低氧灌流液(20%CO2和80% N2混合气体充分饱和,pH值6.5)5~ 15 min,采用全细胞膜片钳技术记录SGC胞膜外向电流,并观察K+通道阻断剂四乙胺(tetraethylammonium,TEA)和四氨基吡啶(4-AP)对电流的影响.结果 乳鼠SGC激活的外向电流具有电压门控外向整流特性,主要包括对TEA敏感的大电导钙激活钾电流(BKCa)和对4-AP敏感的电压门控钾离子通道电流(KV).当钳制电压在-60 mV时,急性缺氧能电压依赖性地增强SGC的外向电流,以增强0~+60 mV电压区间的激活电流为主,+ 60 mV时激活的电流幅度从(1 160.0±129.1)pA增加到(2 428.0±239.3)pA,差异具有统计学意义(n=9,P<0.01).预灌流TEA(1 mmol/L)后,缺氧对SGC外向电流的增强作用明显减小,+ 60 mV激活电压时,TEA+缺氧组与缺氧组相比,外向电流幅度从(2 070.8±115.7) pA降低到(1 062.6±30.9) pA,差异具有统计学意义(n=6,P<0.05).而预灌流4-AP(l mmol/L)后,缺氧对SGC外向电流的增强作用无明显改变(n=6,P>0.05).结论 急性缺氧
作者:王艳萍;朱贺;马克涛;司军强;李丽
来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2015 年 50卷 10期