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目的 研究Cajal间质细胞(ICC)上是否有胃动素受体表达.方法 以10日龄仔兔小肠为组织来源,采用Ⅱ型胶原酶酶解法并结合密度离心法分离、培养细胞;对培养的ICC细胞,采用免疫细胞化学的方法 ;应用ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光染色后,用荧光显微镜对其进行鉴定;应用特异性胃动素受体抗体(anti-GPR38)、c-kit蛋白抗体以及细胞核染料(hoechst33342)联合对培养的细胞进行免疫荧光染色;以流式细胞仪分选的ICC为靶细胞,分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)技术,将提取的细胞总RNA,经反转录后扩增,行3

作者:许文达;江逊;兰莉;仝海霞;王春晖;王宝西

来源:中华儿科杂志 2011 年 49卷 4期

知识库介绍

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作者:
许文达;江逊;兰莉;仝海霞;王春晖;王宝西
来源:
中华儿科杂志 2011 年 49卷 4期
标签:
兔 胃动素受体 流式细胞术 逆转录聚合酶链反应 Cajal间质细胞 Rabbits Motilin receptor Flow cytometry Reverse transcriptase polymerase chain reaction Interstitial cells of Cajal
目的 研究Cajal间质细胞(ICC)上是否有胃动素受体表达.方法 以10日龄仔兔小肠为组织来源,采用Ⅱ型胶原酶酶解法并结合密度离心法分离、培养细胞;对培养的ICC细胞,采用免疫细胞化学的方法 ;应用ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光染色后,用荧光显微镜对其进行鉴定;应用特异性胃动素受体抗体(anti-GPR38)、c-kit蛋白抗体以及细胞核染料(hoechst33342)联合对培养的细胞进行免疫荧光染色;以流式细胞仪分选的ICC为靶细胞,分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)技术,将提取的细胞总RNA,经反转录后扩增,行3