目的 研究羧甲基壳聚糖(CMCS)对一氧化氮诱导大鼠软骨细胞凋亡的影响,并探索p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在该过程中的作用及其机制.方法 体外培养大鼠膝关节软骨细胞,通过Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定软骨细胞；通过不同浓度硝普钠诱导软骨细胞凋亡；实验分为对照组、硝普钠处理组、硝普钠+不同浓度CMCS处理组、硝普钠+p38MAPK抑制剂SB203580处理组.通过流式细胞技术检测软骨细胞凋亡率,Hoechst33342染色观察凋亡细胞核形态变化,罗丹明染色观察软骨细胞线粒体膜电位的改变情况,通过蛋白印迹法检测p38与磷酸化p38(p-p38)的表达.采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 1～3 mmol/L硝普钠可以不同程度地诱导软骨细胞发生凋亡,随着硝普钠浓度的增加凋亡率也增加,当硝普钠浓度为3 mmol/L时其凋亡率为69.8％(P＜0.05)；硝普钠可以增加软骨细胞核碎裂发生率,其核碎裂细胞数明显高于对照组；硝普钠可降低软骨细胞线粒体膜电位水平,与对照组比较差异明显；硝普钠可以增加软骨细胞内p-p38的表达,与对照组比较增加4.3倍.不同浓度CMCS可以降低硝普钠诱导软骨细胞凋亡率,分别为51.0％、29.9％、15.2％,与3mmol/L硝普钠诱导组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；不同浓度CMCS可以降低硝普钠诱导软骨细胞核
作者：贺斌；陶海鹰；卫爱林；刘世清；陈庆
来源：中华风湿病学杂志 2013 年 17卷 8期
