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目的 研究地塞米松对体外培养的成骨细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的作用机制.方法 体外分离培养SD大鼠成骨细胞,观察细胞形态,应用碱性磷酸酶染色法和茜素红染色法鉴定成骨细胞.取1~3代对数生长期细胞,分为空白对照组、低剂量地塞米松组(10-8 mol/L)、中剂量地塞米松组(10-7 mol/L)、高剂量地塞米松组(10-6 mol/L),分别干预12、24、48 h,运用Cell Counting Kit-8法检测细胞增殖情况,采用Annexin Ⅴ/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光法观察细胞核的形态和caspase-3的表达,蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bad、caspase-3、磷酸化Akt的表达.采用单因素方差分析,两两比较方差齐采用LSD-t法进行统计分析.结果 10-8 mol/L、10-7mol/L、10-6 mol/L地塞米松能抑制成骨细胞增殖,以48 h最为明显(A值分别为:0.980±0.028,0.798±0.057,0.728±0.031),与空白对照组(1.143±0.017)相比,差异有统计学意义(t=5.454,11.555,13.908;P均<0.05);不同浓度地塞米松干预48 h后,成骨细胞凋亡率逐渐升高.与空白对照组[(4.1±0.8)%]相比,10-8 mol/L地塞米松组细胞凋亡率[(4.9±1.2)%]升高差异无统计学意义(t=0.470,P>0.05),10-7mol/L、10-6mol/L地塞米松组的成骨细胞凋亡率分别为(9.8±2.6)%、(12.4±2.6)%,呈显著性升

作者:潘吉铭;蔡劲薇;伍龙果;梁敏

来源:中华风湿病学杂志 2018 年 22卷 2期

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作者:
潘吉铭;蔡劲薇;伍龙果;梁敏
来源:
中华风湿病学杂志 2018 年 22卷 2期
标签:
地塞米松 骨质疏松 细胞凋亡 PI3K/Akt Dexamethasone Osteoporosis Apoptosis PI3k/Akt
目的 研究地塞米松对体外培养的成骨细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的作用机制.方法 体外分离培养SD大鼠成骨细胞,观察细胞形态,应用碱性磷酸酶染色法和茜素红染色法鉴定成骨细胞.取1~3代对数生长期细胞,分为空白对照组、低剂量地塞米松组(10-8 mol/L)、中剂量地塞米松组(10-7 mol/L)、高剂量地塞米松组(10-6 mol/L),分别干预12、24、48 h,运用Cell Counting Kit-8法检测细胞增殖情况,采用Annexin Ⅴ/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光法观察细胞核的形态和caspase-3的表达,蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bad、caspase-3、磷酸化Akt的表达.采用单因素方差分析,两两比较方差齐采用LSD-t法进行统计分析.结果 10-8 mol/L、10-7mol/L、10-6 mol/L地塞米松能抑制成骨细胞增殖,以48 h最为明显(A值分别为:0.980±0.028,0.798±0.057,0.728±0.031),与空白对照组(1.143±0.017)相比,差异有统计学意义(t=5.454,11.555,13.908;P均<0.05);不同浓度地塞米松干预48 h后,成骨细胞凋亡率逐渐升高.与空白对照组[(4.1±0.8)%]相比,10-8 mol/L地塞米松组细胞凋亡率[(4.9±1.2)%]升高差异无统计学意义(t=0.470,P>0.05),10-7mol/L、10-6mol/L地塞米松组的成骨细胞凋亡率分别为(9.8±2.6)%、(12.4±2.6)%,呈显著性升