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目的:探讨白藜芦醇(RES)对IL-1β诱导的软骨细胞的影响及其作用通路。方法:提取Wistar乳鼠软骨细胞,实验分为5组:对照组,IL-1β组,RES+IL-1β组,RES+IL-1β+EX-527[沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂]组,RES+IL-1β+AS[叉头框转录因子O1(FOXO1)抑制剂]组。采用实时荧光定量(qRT)-PCR检测SIRT1、FOXO1和MMP-3 mRNA表达量。免疫荧光技术检测软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)的蛋白表达,蛋白质免疫印迹技术检测软骨细胞SIRT1,p-FOXO1/FOXO1的蛋白表达。ELISA检测软骨细胞炎性因子IL-6和TNF-α分泌量。计量资料多组间比较行单因素方差分析,组间两两比较采用LSD- t法。以 P<0.05差异具有统计学意义。 结果:与正常软骨细胞相比,IL-1β诱导的软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1/FOXO1的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞TNF-α[(24.70±2.84), t=19.24, P<0.001]和IL-6的分泌量[(3.35±0.28), t=12.97, P<0.001]明显升高、MMP-3的mRNA表达[(2.46±0.23), t=12.61, P<0.001]明显升高。RES作用于IL-1β诱导软骨细胞后,Ⅱ型胶原蛋白、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1/FOXO1的mRNA和蛋白表达明显升高( P<0.001),细胞TNF-α

作者:梁传财;王晨宇;邢亨特;姚佳炜;龚梓恒;邱波

来源:中华风湿病学杂志 2022 年 26卷 8期

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作者:
梁传财;王晨宇;邢亨特;姚佳炜;龚梓恒;邱波
来源:
中华风湿病学杂志 2022 年 26卷 8期
标签:
骨关节炎 叉头转录因子类 白藜芦醇 沉默信息调节因子1 叉头框转录因子O1 Osteoarthritis Forkhead transcription factors Resveratrol SIRT1 FOXO1
目的:探讨白藜芦醇(RES)对IL-1β诱导的软骨细胞的影响及其作用通路。方法:提取Wistar乳鼠软骨细胞,实验分为5组:对照组,IL-1β组,RES+IL-1β组,RES+IL-1β+EX-527[沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂]组,RES+IL-1β+AS[叉头框转录因子O1(FOXO1)抑制剂]组。采用实时荧光定量(qRT)-PCR检测SIRT1、FOXO1和MMP-3 mRNA表达量。免疫荧光技术检测软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)的蛋白表达,蛋白质免疫印迹技术检测软骨细胞SIRT1,p-FOXO1/FOXO1的蛋白表达。ELISA检测软骨细胞炎性因子IL-6和TNF-α分泌量。计量资料多组间比较行单因素方差分析,组间两两比较采用LSD- t法。以 P<0.05差异具有统计学意义。 结果:与正常软骨细胞相比,IL-1β诱导的软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1/FOXO1的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞TNF-α[(24.70±2.84), t=19.24, P<0.001]和IL-6的分泌量[(3.35±0.28), t=12.97, P<0.001]明显升高、MMP-3的mRNA表达[(2.46±0.23), t=12.61, P<0.001]明显升高。RES作用于IL-1β诱导软骨细胞后,Ⅱ型胶原蛋白、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1/FOXO1的mRNA和蛋白表达明显升高( P<0.001),细胞TNF-α