目的:为了更加简便有效地得到重组人血小板生长因子(rhTPO),以治疗放射及化学药物等所致骨髓损伤造成的血小板减少与缺乏,缓解临床上的出血症状,降低死亡率。方法:本实验从6月龄人胚胎肝脏细胞中分离mRNA,设计合成特异性引物,经逆转录,套式PCR等步骤克隆出了人TPO全基因。将人TPO基因亚克隆至原核细胞表达载体pBV220,形成了重组表达质粒pBV220/TPO,以该重组质粒转化了原核细胞大肠杆菌DH5α,应用42℃热诱导表达目的蛋白。结果:经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,得到了TPO在原核细胞中的表达,其分子量与目的一致。结论:hTPO可以在原核细胞得到良好的表达,为临床血小板减少症的生物治疗奠定了基础。
作者:曹华;葛忠良;张群伟;孙丽亚;张雪峰;丁清明
来源: 1997 年 17卷 5期