目的 研究体外培养的Nf1+/-小鼠破骨细胞合成、分泌骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的能力,应用OPN中和抗体抑制破骨细胞分泌的OPN,测定破骨细胞功能,并与野生型破骨细胞比较,分析OPN在Nf1+/-小鼠破骨细胞功能增强中的作用.方法 配对选取神经纤维瘤病基因野生型(Nf+/+)和杂合型(Nf+/-)基因型小鼠,采集骨髓单个核细胞,体外培养破骨细胞,获取体外培养破骨细胞不同时期的上清液,做ELISA分析检测OPN浓度,并与Nf1+/+破骨细胞比较；在加入OPN中和抗体或等量PBS的条件下,测定体外培养的Nf1+/-小鼠破骨细胞的形成数量,应用Transwell小室方法测定破骨细胞迁移功能,应用自然贴壁法测定破骨细胞黏附功能,应用骨片吸收法测定破骨细胞骨吸收功能,并进行数据分析.结果 在体外培养的Nf1+/-小鼠破骨细胞上清液中,OPN含量比野生型小鼠破骨细胞上清液中含量明显增高,培养6d的破骨细胞上清液中OPN含量的差异更为明显.体外培养Nf1+/-破骨细胞形成数量比Nf1+/+破骨细胞明显增多,破骨细胞的黏附功能、迁移功能以及骨吸收功能较Nf1+/+破骨细胞明显增强,差异有统计学意义；在培养时加入有活性的OPN中和抗体,可以抑制Nf1+/-破骨细胞的形成,破骨细胞的黏附能力、迁移能力以及骨吸收功能均降低,恢复到野生型水平.结论 自分泌OPN在Nf1+/-小
作者：李会杰；刘亚玲；井永敏；张英泽；王振昊；闫金成
来源：中华骨科杂志 2013 年 33卷 11期
