抗Caspase-12核酶的制备与体外活性鉴定-临床诊疗知识库

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作者：

姜山；谢青；张(韦华)；周霞秋；俞红；金由辛

来源：

中华肝脏病杂志 2005 年 13卷 2期

标签：

核糖核酸酶转录 Caspase-12 活性鉴定

目的设计针对小鼠内质网应激凋亡途径中Caspase-12 mRNA的锤头状核酶(Rz138、Rz218),通过靶基因及核酶的体外转录、切割,进行核酶活性鉴定,评估其应用前景.方法小鼠Caspase-12基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增片段克隆于PGEM-T载体的T7启动子下游,通过α-32p UTP标记的体外转录物作为靶RNA.设计合成针对小鼠Caspase-12 mRNA的核酶,通过PCR方法扩增核酶的转录模板,采用非同位素标记法行体外转录,核酶与靶RNA进行体外切割实验.结果在37℃,Rz138、Rz21g均有切割活性,Rz138的切割效率较高,几乎100

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