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目的 从大容量人源Fab抗体库中筛选全人源抗c-Met抗体,并对抗体与肝癌细胞的结合活性进行初步鉴定.方法 利用Met-Fc融合蛋白对大容量人源Fab抗体库进行固相筛选,经过5轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法差减鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用c-Met表达阳性的人肝癌细胞株鉴定抗c-Met抗体Fab的结合活性.结果 Western blot、免疫荧光结果显示,c-Met分子表达于SMMC721、BEL7402人肝癌细胞膜上;从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗c-Met抗体Fab(AM2-26),经免疫共沉淀、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析,结果显示AM2-26与人肝癌细胞表面c-Met分子有较好的结合活性.结论 从人源Fab抗体库中筛选的AM2-26能够与肝癌细胞表面c-Met分子特异性结合,为研制用于肝癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子.

作者:孙慧;万佳艺;朱晓娟;焦永军;朱进;冯振卿;刘政

来源:中华肝脏病杂志 2008 年 16卷 7期

知识库介绍

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作者:
孙慧;万佳艺;朱晓娟;焦永军;朱进;冯振卿;刘政
来源:
中华肝脏病杂志 2008 年 16卷 7期
标签:
癌,肝细胞,受体蛋白质酪氨酸激酶类 治疗 Carcinoma,hepatocellular Receptor protein-tyrosine kinases Therapy
目的 从大容量人源Fab抗体库中筛选全人源抗c-Met抗体,并对抗体与肝癌细胞的结合活性进行初步鉴定.方法 利用Met-Fc融合蛋白对大容量人源Fab抗体库进行固相筛选,经过5轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法差减鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用c-Met表达阳性的人肝癌细胞株鉴定抗c-Met抗体Fab的结合活性.结果 Western blot、免疫荧光结果显示,c-Met分子表达于SMMC721、BEL7402人肝癌细胞膜上;从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗c-Met抗体Fab(AM2-26),经免疫共沉淀、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析,结果显示AM2-26与人肝癌细胞表面c-Met分子有较好的结合活性.结论 从人源Fab抗体库中筛选的AM2-26能够与肝癌细胞表面c-Met分子特异性结合,为研制用于肝癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子.