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目的 观察内源性大麻素(AEA)对血吸虫肝纤维化小鼠原代肝星状细胞(HSC)增殖及磷酸化-Erk(P-Erk)的影响,为大麻素在肝纤维化领域的研究提供理论依据. 方法 (1)腹部皮肤贴敷尾蚴建立血吸虫肝纤维化模型;(2) HE和Masson染色证实肝纤维化形成;(3)非连续密度梯度离心法提取原代HSC;(4)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白免疫荧光双重染色鉴定原代HSC;(5)二甲基偶氮唑盐法检测AEA对HSC增殖的影响;(6)Western blot检测AEA对HSC磷酸化-Erk表达的影响.多个样本的均数比较采用单因素方差分析,若方差齐则采用LSD检验,若方差不齐采用Dunnett T3检验.结果 (1)成功建立血吸虫肝纤维化模型:HE染色显示嗜酸性肉芽肿形成,Masson染色显示出现围绕血管的胶原纤维沉积;(2)成功提取高纯度的原代HSC:纯度约为95%;(3)AEA能呈浓度依赖性地抑制HSC的增殖:5、10、20、40、60、80、100、120 μmol/L组AEA对HSC的抑制率分别为5.14%±1.61%、10.34%±3.22%、14.12%±3.98%、18.64%±3.67%、23.86%±3.06%、62.81%±7.75%、70.39%±7.11%、72.31%±6.71%;(4)AEA能呈浓度和时间依赖性地增加P-Erk的表达:20、60、120 μ mol/L组的平均灰度值分别为39.90±4.61、43.45±0.91、52.91±1.97,与阴性对照组(19.21±1.6

作者:刘萍;王密;陆小丹;张淑娟;唐望先

来源:中华肝脏病杂志 2013 年 21卷 1期

知识库介绍

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作者:
刘萍;王密;陆小丹;张淑娟;唐望先
来源:
中华肝脏病杂志 2013 年 21卷 1期
标签:
肝硬化 血吸虫病 细胞增殖 内源性大麻酚类 肝星状细胞 血吸虫肝纤维化 P-Erk Liver cirrhosis Schistosomasis Cell proliferation Endocannabinoids Hepatic stellate cells Schistosome-induced liver fibrosis Phosphorylation-Erk
目的 观察内源性大麻素(AEA)对血吸虫肝纤维化小鼠原代肝星状细胞(HSC)增殖及磷酸化-Erk(P-Erk)的影响,为大麻素在肝纤维化领域的研究提供理论依据. 方法 (1)腹部皮肤贴敷尾蚴建立血吸虫肝纤维化模型;(2) HE和Masson染色证实肝纤维化形成;(3)非连续密度梯度离心法提取原代HSC;(4)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白免疫荧光双重染色鉴定原代HSC;(5)二甲基偶氮唑盐法检测AEA对HSC增殖的影响;(6)Western blot检测AEA对HSC磷酸化-Erk表达的影响.多个样本的均数比较采用单因素方差分析,若方差齐则采用LSD检验,若方差不齐采用Dunnett T3检验.结果 (1)成功建立血吸虫肝纤维化模型:HE染色显示嗜酸性肉芽肿形成,Masson染色显示出现围绕血管的胶原纤维沉积;(2)成功提取高纯度的原代HSC:纯度约为95%;(3)AEA能呈浓度依赖性地抑制HSC的增殖:5、10、20、40、60、80、100、120 μmol/L组AEA对HSC的抑制率分别为5.14%±1.61%、10.34%±3.22%、14.12%±3.98%、18.64%±3.67%、23.86%±3.06%、62.81%±7.75%、70.39%±7.11%、72.31%±6.71%;(4)AEA能呈浓度和时间依赖性地增加P-Erk的表达:20、60、120 μ mol/L组的平均灰度值分别为39.90±4.61、43.45±0.91、52.91±1.97,与阴性对照组(19.21±1.6