目的 研究各类肝硬化患者Th1/Th22失衡的特点及其与病程进展的关系,探索靶向治疗肝硬化的免疫治疗策略.方法 体外离心法分离外周血单个核细胞,收集细胞进行CD3-BV500及CD8-PerCP-Cy5.5染色,再加入干扰素γ(IFNv)-PE-Cy7、白细胞介素(IL)-17a-APC和IL-22-PE或者相应的同型对照,破膜洗液洗涤1次后加1％多聚甲醛固定.使用Flowjo分析软件进行T淋巴细胞亚群及细胞因子分析.定义Th1 (CD4+IFNγ+),Th 17(C D4+IL-17a+),Th22(CD4+IL-22+)以及Tc1 (CD8+IFNγ+),Tc17(CD8+IL-17a+),Tc22 (CD8+IL-22+),调查上述6个亚群分泌IFN γ、IL-17a、IL-22的情况.LX-2细胞无血清培养,添加不同浓度(25、50、100 ng/ml)的重组人IL-22重组蛋白;24h后用活化指标α-平滑肌肌动蛋白检测LX-2活化情况,体积分数10％胎牛血清作为阳性对照.用酶联免疫吸附试验(化学发光法)检测上清液中透明质酸、Ⅲ型胶原前体、Ⅳ型胶原浓度.据资料不同分别采用one-way ANOVA、Mann-Whitney非参数U检验或Kruskalwallis H非参数检验进行统计学分析.结果 各类病因引起的肝硬化患者外周血Tc1、Th17和Th22细胞均较健康对照组显著增加.所有肝硬化患者Th17细胞频率(4.25％±2.45％)较对照组(2.59％±1.36％)增加了0.64倍,而肝硬化患者Th22细胞平均频率(4.17％±

作者：吴海沁；赵娟娟；李捍卫；张政

来源：中华肝脏病杂志 2017 年 25卷 10期