目的 探讨转化生长因子(TGF)β在体外对肝祖细胞迁移能力的影响及其作用机制. 方法 两步灌注法分离雄性野生型C57BL/6J小鼠原代肝祖细胞,用不同浓度TGF β刺激,相差显微镜下观察细胞形态;划痕实验和Transwell实验评估TGF β对肝祖细胞迁移能力的影响;表达谱测序和信号通路磷酸化抗体检测TGF β对肝祖细胞调控涉及的信号通路,并检测PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路蛋白水平及各信号分子在肝祖细胞中的定位.两组间数据比较用独立样本f检验,多组间数据比较用单因素方差分析. 结果 TGF β使肝祖细胞由卵圆形变为长梭型,划痕实验显示24 h对照组和2 ng/ml TGF β、10 ng/ml TGF β组的划痕愈合率分别为36.48％±4.37％、57.35％±4.60％、73.14％士5.02％ (F=65.87,P＜0.01).Transwell实验显示24h对照组和2ng/ml TGF β、10 ng/ml TGF β组的迁移细胞数分别为(127±16)个、(230± 18)个、(385±36)个(F=94.99,P＜0.01).表达谱测序结果表明TGF β调控肝祖细胞基因表达,其差异表达基因参与H3K/AKT信号通路.信号通路磷酸化抗体芯片和Western blot检测结果显示TGFβ能调控肝祖细胞PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路.同时免疫荧光实验结果显示磷酸化(p) 70S6K、pAKT1和PI3K与F-肌动蛋白共定位. 结论 TGF β能通过PI3K/AKT/

作者：濮雪华；李飞；缪小莉；叶纪录；陆伦根

来源：中华肝脏病杂志 2018 年 26卷 9期