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目的 探索Huh7肝癌细胞缺氧培养下分泌的外泌体对常氧Huh7肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响. 方法 通过差速超速离心提取缺氧条件下Huh7细胞分泌的缺氧外泌体,利用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析以及Western blot实验来鉴定缺氧外泌体.将缺氧外泌体与Huh7细胞在常氧下共培养后,分别采用CCK8、细胞划痕、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化.采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析. 结果 缺氧的Huh7细胞分泌的外泌体大小在30 ~ 150 nm之间,且表达有外泌体表面标志物CD9、CD63和TSG101.缺氧外泌体可显著增强常氧Huh7细胞的增殖(48h:缺氧外泌体组与对照组A值分别为2.131±0.092与1.760±0.104,t=3.740,P<0.01;72h:缺氧外泌体组与对照组A值分别为3.121±0.157与2.298±0.085,t=8.289,P<0.01)、迁移[24 h:缺氧外泌体组与对照组的迁移距离分别为(0.37±0.06) cm与(0.19±0.05) cm,t=4.813,P<0.05;48h:缺氧外泌体组与对照组的迁移距离分别为(1.15±0.07) cm与(0.62±0.08) cm,t=8.874,P<0.05]及侵袭能力[缺氧外泌体组(123±18)个与对照组(44±12)个,t=6.203,P<0.01].结论 缺氧环境下肝癌Huh7细胞分泌的外泌体可以促进Huh7细胞的增殖、迁移及侵袭,提示缺氧外泌体介导的细胞间信息传递可能

作者:邹敏;游逾;何松;吴小翎

来源:中华肝脏病杂志 2019 年 27卷 5期

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作者:
邹敏;游逾;何松;吴小翎
来源:
中华肝脏病杂志 2019 年 27卷 5期
标签:
外泌体 肝肿瘤 细胞迁移分析 细胞增殖 肿瘤侵润 Exosomes Liver neoplasms Cell migration assays Cell proliferation Neoplasm invasiveness
目的 探索Huh7肝癌细胞缺氧培养下分泌的外泌体对常氧Huh7肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响. 方法 通过差速超速离心提取缺氧条件下Huh7细胞分泌的缺氧外泌体,利用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析以及Western blot实验来鉴定缺氧外泌体.将缺氧外泌体与Huh7细胞在常氧下共培养后,分别采用CCK8、细胞划痕、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化.采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析. 结果 缺氧的Huh7细胞分泌的外泌体大小在30 ~ 150 nm之间,且表达有外泌体表面标志物CD9、CD63和TSG101.缺氧外泌体可显著增强常氧Huh7细胞的增殖(48h:缺氧外泌体组与对照组A值分别为2.131±0.092与1.760±0.104,t=3.740,P<0.01;72h:缺氧外泌体组与对照组A值分别为3.121±0.157与2.298±0.085,t=8.289,P<0.01)、迁移[24 h:缺氧外泌体组与对照组的迁移距离分别为(0.37±0.06) cm与(0.19±0.05) cm,t=4.813,P<0.05;48h:缺氧外泌体组与对照组的迁移距离分别为(1.15±0.07) cm与(0.62±0.08) cm,t=8.874,P<0.05]及侵袭能力[缺氧外泌体组(123±18)个与对照组(44±12)个,t=6.203,P<0.01].结论 缺氧环境下肝癌Huh7细胞分泌的外泌体可以促进Huh7细胞的增殖、迁移及侵袭,提示缺氧外泌体介导的细胞间信息传递可能