为探讨盐酸小檗碱对LX2人肝星状细胞(HSC-LX2)增殖与胶原分泌的影响,取对数生长期的HSC-LX2细胞,分为空白对照组和盐酸小檗碱低、中、高浓度组(5、10、20 μg/ml),盐酸小檗碱作用12 h.细胞增殖行MTT分析,流式细胞术检测细胞周期情况.通过放射免疫方法检测细胞培养液I型胶原、Ⅲ型胶原含量.通过实时荧光定量PCR检测局部黏着斑激酶(FAK)、I型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制物l(TIMP-1)mRNA的表达,通过蛋白质印迹法分析FAK、磷酸化FAK、I型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-13、TIMP-1蛋白的表达.与空白对照组比较,盐酸小檗碱干预组细胞的积分吸光度值降低、G2/M期细胞比例下降同时G0/G1期细胞比例增加(P < 0.05),分泌I型胶原、Ⅲ型胶原水平均有下降(P < 0.05), FAK、I型胶原与Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达水平下降(P < 0.05),磷酸化FAK蛋白的表达水平下降(P < 0.05),MMP-13、TIMP-1、MMP-13/TIMP-1 mRNA及蛋白的表达增加(P < 0.05).提示盐酸小檗碱抑制肝星状细胞增殖与胶原分泌,其机制为通过抑制FAK的磷酸化促进MMP-1和TIMP-1的表达.
作者:张建;赵红伟;侯洪涛;张大雷;刘娜;白云;胡义亭;王玉珍
来源:中华肝脏病杂志 2019 年 27卷 7期