目的 观察烟草烟雾提取物(CSE)对肺动脉内皮细胞(HPAEC)衰老的影响以及细胞衰老相关分泌表型(SASP)对肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)的增殖和迁移效应.方法 对HPAEC给予不同浓度的CSE,分别于0、6、12、24、48和72 h观察并使用CCK8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞的增殖情况,利用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)衰老染色对衰老细胞进行拍照染色计数, Western blot法检测衰老相关蛋白的表达情况,免疫荧光检测细胞中蛋白的表达量,实时PCR检测衰老相关基因的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测分泌的细胞因子浓度,Transwell检测HPASMC的迁移情况.结果 与0 h时比较,48 h时细胞活性明显降低,吸光度值为(1.8±0.1),差异有统计学意义(P<0.05);72 h时细胞活性(1.8±0.1)下降更加明显(P<0.01).流式细胞术检测细胞周期发现CSE刺激后S期细胞(14.1±1.2)数量较前(28.5±1.8)明显下降,细胞周期阻滞较为明显且具有统计学意义(P<0.01).细胞衰老相关分泌表型(SASP)的含量不断升高,其中MCP-1含量0 h时为(177±39),48 h时为(460±43),72 h时为(609±64);TGF-β1含量0 h时为(121±18),48 h时为(413±32),72 h时为(606±67);bFGF含量0 h时为(123±17),48 h时为(291±13),72 h时为(471±43),差异均有统计学意义(均P<0.05).Western blot法

作者：蔡磊；朱朋成；王月娥；高雨彤；敖启林

来源：中华结核和呼吸杂志 2017 年 40卷 6期