目的 探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)诱导软骨细胞自噬抑制骨关节炎(osteoarthritis,OA)进展的可能性.方法 体外分离培养软骨细胞,应用地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导凋亡,然后用RAPA干预.将正常软骨细胞和OA软骨细胞分别分为3组:BSA组、DEX-BSA组、RAPA+DEX-BSA组.MTT法检测软骨细胞活性,GFP-RFP-LC3腺病毒、Western-Blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测自噬流水平和自噬相关蛋白LC3、Beclin1和ULK1蛋白及基因表达.qRT-PCR和ELISA法检测IL-1、TNF-α浓度.Annexin V-FITC/PI法及TUNEL法检测凋亡.结果 Western-Blot显示无论正常和OA软骨细胞,与DEX-BSA组比较,RAPA+DEX-BSA组总LC3B、LC3B-Ⅱ、Beclin1和ULK1表达显著增加[正常软骨细胞DEX-BSA组分别为(1.477±0.0297)、(0.727±0.0231)、(0.240±0.0063)、(0.261±0.008),正常软骨细胞RAPA+DEX-BSA组分别为(3.648±0.0408)、(2.020±0.012)、(0.900±0.0284)、(0.604±0.0119)(P<0.01);OA软骨细胞DEX-BSA组分别为(3.085±0.081)、(1.637±0.0503)、(0.586±0.0033)、(0.446±0.0188),OA软骨细胞RAPA+DEX-BSA组分别为(5.579±0.1920)、(3.17±0.0844)、(0.970±0.0245)、(0.650±0.01),P<0.01].qRT-PCR显示正常和OA软骨细胞,与DEX-BSA组比较,RAPA+DEX-BSA

作者：王芳芳；李鸿斌

来源：中华临床免疫和变态反应杂志 2019 年 13卷 6期