目的:通过 RNA 干扰技术研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对宫颈癌 Caski 细胞上皮-间质转化(EMT)的影响作用。方法通过构建重组真核表达载体 pGenesil-1-MIF siRNA,转染宫颈癌 Caski 细胞(Caski-pGenesil-MIF siRNA 组),同时设空载体转染组(Caski-pGenesil-1组)和空白对照组(Caski 组),采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测 Caski 细胞中 MIF mRNA 相对表达量的变化,并检测转染前后 Caski 细胞中 EMT 相关指标E-cadherin 和 Vimentin 的表达变化。结果 pGenesil-1-MIF siRNA 转染 Caski 细胞后 MIF mRNA 的表达量减少,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RNA 干扰抑制 MIF 基因表达后,与对照组相比,pGenesil-1-MIF siRNA 组 Caski 细胞上皮标记物 E-cadherin mRNA 及蛋白表达水平上调(P<0.05),间叶标记物 Vimentin mRNA 及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论抑制 MIF基因表达可抑制宫颈癌 Caski 细胞发生 EMT 的能力。
作者:张素玉;吴素慧;李慧
来源:中华临床医师杂志(电子版) 2015 年 14期