目的 观察二氧化硅(SiO2)对肺上皮细胞间质转化中E钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,并探讨表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在肺纤维化上皮间质转化中的作用.方法 用50 μg/ml的SiO2粉尘刺激肺泡巨噬细胞(AM),分别作用3、6、12、18、24、36 h后收集上清液,用ELISA方法检测上清中TGF-β1蛋白的表达,并以TGF-β1表达的高峰时间点(T18h)的AM培养上清作为条件培养上清.用终浓度分别为0(对照组)、50(50 μg/mlSiO2)、100(100 μg/ml SiO2)、200 μg/ml(200 μg/ml SiO2)的SiO2粉尘与AM条件培养上清液(T18 h)共同刺激肺上皮细胞,孵育48 h后,于倒置显微镜下观察细胞形态学改变,并收集不同时段细胞,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA表达水平,细胞免疫荧光方法检测E-cadherin、α-SMA及EGFR蛋白表达的变化.结果 染尘组AM培养上清液中TGF-β1蛋白的表达在各时间点均明显高于对照组,且随作用时间的延长呈先升高后降低的趋势,18h时水平最高,差异有统计学意义(P<0.05).倒置显微镜观察肺上皮细胞经SiO2处理后细胞形态出现间质细胞特点,由鹅卵石状转变为纺锤形或梭型,伪足样改变,似成纤维细胞,SiO2 200 μg/ml组最明显.随着SiO2浓
作者:宋文文;张正福;肖华;孙少杰;张华
来源:中华劳动卫生职业病杂志 2015 年 33卷 9期