目的 应用RNA干扰技术研究EF-1 alpha基因在体外培养前列腺癌细胞株DU145的侵袭和迁移中的作用. 方法将DU145细胞系分为3组:对照组(未转染siRNA),转染对照组(转染siRNA)和实验组(转染EF-1 alpha-siRNA).通过免疫荧光技术验证RNA干扰结果,并研究EF-1 alpha在DU145细胞中的定位以及与F-actin的定位关系.应用Transwell实验,比较EF-1alpha蛋白质水平调节前后各组肿瘤细胞侵袭和迁移能力的变化. 结果应用RNA干扰技术可以特异高效调低DU145细胞中EF-1 alpha蛋白质水平.EF-1 alpha蛋白质定位于细胞胞浆内,且该蛋白与F-actin存在共定位关系.但EF-1 alpha表达的改变不影响F-actin的分布.细胞迁移和侵袭能力研究结果显示,20×104个DU145细胞种入Transwall小室12 h后,对照组,转染对照组和实验组穿膜细胞数日分别为(10.6±1.0)×104个、(11.2±0.8)×104个和(3.9×0.6)×104个.与对照组相比,调低EF-1 alpha表达显著降低了前列腺癌细胞株DU145迁移和侵袭能力到37.1
作者:朱刚;钟惟德;闫伟;万奔;王建业
来源:中华老年医学杂志 2009 年 28卷 1期