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目的 探讨乳化异氟醚对入神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y细胞)凋亡的影响及c-Jun氨基末端激酶(JNK)在其中的作用.方法 将培养的SHSY-5Y细胞按种子96孔板或培养皿,采用随机数字表法分为8组:空白对照组(C组,n=24)、不同浓度脂肪乳剂组[LE1组(n=24)、LE2组(n=24)和LE3组(n=72)]、不同浓度乳化异氟醚组[EI1组(n=24)、EI2组(n=24)和EI3(n=72)]和乳化异氟醚+JNK抑制剂SP600125组(EI-SP组,n=24).细胞铺板24 h时,LE1-3组加入30%脂肪乳剂,浓度分别为0.395 6、0.791 2和1.582 4 μl/ml;EI1-3组加入8%乳异氟醚,终浓度分别为0.56、1.12和2.24 mmol/L;EI-SP组加入乳化异氟醚,终浓度为1.12 mmol/L,并于加入乳化异氟醚前1h加入SP 600125,终浓度为10 μmol/L;C组不行任何处理.El3组及LE3组于孵育6、12和24 h时,其余组孵育或培养24 h时观察细胞形态学、采用MTT法测定细胞活力、采用Western blot法测定细胞JNK、磷酸化JNK (p-JNK)和细胞色素c(Cyt c)的表达水平.结果 与C组比较,EI2组孵育24h时、EI3组孵育12和24 h时细胞活力降低,p-JNK以及Cyt c表达上调,EI-SP组细胞活力降低(P<0.05),p-JNK以及Cyt c表达差异无统计学意义,LE1-3组和EI1组细胞活力、p-JNK以及Cyt c表达差异无统计学意义(P>0.05);与EI1组比较,EI2,3组孵育24 h时

作者:吕静静;李元海

来源:中华麻醉学杂志 2016 年 36卷 3期

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作者:
吕静静;李元海
来源:
中华麻醉学杂志 2016 年 36卷 3期
标签:
异氟醚 脂肪乳剂,静脉注射用 神经元 细胞凋亡 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 Isoflurane Fat emulsions,intravenous Neurons Apoptosis JNK mitogen-activated protein kinases
目的 探讨乳化异氟醚对入神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y细胞)凋亡的影响及c-Jun氨基末端激酶(JNK)在其中的作用.方法 将培养的SHSY-5Y细胞按种子96孔板或培养皿,采用随机数字表法分为8组:空白对照组(C组,n=24)、不同浓度脂肪乳剂组[LE1组(n=24)、LE2组(n=24)和LE3组(n=72)]、不同浓度乳化异氟醚组[EI1组(n=24)、EI2组(n=24)和EI3(n=72)]和乳化异氟醚+JNK抑制剂SP600125组(EI-SP组,n=24).细胞铺板24 h时,LE1-3组加入30%脂肪乳剂,浓度分别为0.395 6、0.791 2和1.582 4 μl/ml;EI1-3组加入8%乳异氟醚,终浓度分别为0.56、1.12和2.24 mmol/L;EI-SP组加入乳化异氟醚,终浓度为1.12 mmol/L,并于加入乳化异氟醚前1h加入SP 600125,终浓度为10 μmol/L;C组不行任何处理.El3组及LE3组于孵育6、12和24 h时,其余组孵育或培养24 h时观察细胞形态学、采用MTT法测定细胞活力、采用Western blot法测定细胞JNK、磷酸化JNK (p-JNK)和细胞色素c(Cyt c)的表达水平.结果 与C组比较,EI2组孵育24h时、EI3组孵育12和24 h时细胞活力降低,p-JNK以及Cyt c表达上调,EI-SP组细胞活力降低(P<0.05),p-JNK以及Cyt c表达差异无统计学意义,LE1-3组和EI1组细胞活力、p-JNK以及Cyt c表达差异无统计学意义(P>0.05);与EI1组比较,EI2,3组孵育24 h时