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目的 评价异丙酚后处理对糖尿病性心肌细胞缺氧复氧损伤时坏死性凋亡的影响.方法 正常培养的H9C2心肌细胞,采用随机数字表法分为5组(n=19):对照组(C组)用含5.5 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h;高糖组(HG组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h;缺氧复氧组(H∕R组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h,然后缺氧复氧;异丙酚后处理组(P组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h,然后缺氧复氧,复氧即刻加入终浓度为50μmol∕L的异丙酚;溶剂对照组(DMSO组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h,然后缺氧复氧,复氧即刻加入终浓度150μmol∕L的二甲基亚砜.采用缺氧6 h,复氧12 h的方法制备心肌细胞缺氧复氧损伤模型.于复氧12 h时,采用CCK-8法检测细胞存活率,测定细胞培养液LDH生成量,采用流式细胞术测定细胞ROS水平,采用TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测受体相互作用蛋白1(RIP1)、RIP3、Bax、Bcl-2、活化的caspase-3和caspase-3的表达水平,计算活化的caspase-3∕caspase-3比值.结果 与C组比较,HG组细胞活力降低,LDH生成量增加,ROS水平和细胞凋亡率升高,RIP1、RIP3和Bax表达上调,Bcl-2表达下调,活化的caspase-3∕caspase-3比值升高(P<0.05).与HG组比较,H∕R组细胞活力降低,

作者:谢桂玲;李浩波;夏正远;任从才;刘新

来源:中华麻醉学杂志 2018 年 38卷 3期

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作者:
谢桂玲;李浩波;夏正远;任从才;刘新
来源:
中华麻醉学杂志 2018 年 38卷 3期
标签:
二异丙酚 缺血后处理 糖尿病 肌细胞,心脏 再灌注损伤 坏死性凋亡 Propofol Ischemic postconditioning Diabetes mellitus Myocytes cardiac Reperfusion injury Necroptosis
目的 评价异丙酚后处理对糖尿病性心肌细胞缺氧复氧损伤时坏死性凋亡的影响.方法 正常培养的H9C2心肌细胞,采用随机数字表法分为5组(n=19):对照组(C组)用含5.5 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h;高糖组(HG组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h;缺氧复氧组(H∕R组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h,然后缺氧复氧;异丙酚后处理组(P组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h,然后缺氧复氧,复氧即刻加入终浓度为50μmol∕L的异丙酚;溶剂对照组(DMSO组)用含25 mmol∕L葡萄糖的DMEM培养基培养48 h,然后缺氧复氧,复氧即刻加入终浓度150μmol∕L的二甲基亚砜.采用缺氧6 h,复氧12 h的方法制备心肌细胞缺氧复氧损伤模型.于复氧12 h时,采用CCK-8法检测细胞存活率,测定细胞培养液LDH生成量,采用流式细胞术测定细胞ROS水平,采用TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测受体相互作用蛋白1(RIP1)、RIP3、Bax、Bcl-2、活化的caspase-3和caspase-3的表达水平,计算活化的caspase-3∕caspase-3比值.结果 与C组比较,HG组细胞活力降低,LDH生成量增加,ROS水平和细胞凋亡率升高,RIP1、RIP3和Bax表达上调,Bcl-2表达下调,活化的caspase-3∕caspase-3比值升高(P<0.05).与HG组比较,H∕R组细胞活力降低,