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目的 评价小鼠巨噬细胞焦亡时肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2 (TIPE2)与caspase-11的关系.方法 采用随机数字表法将小鼠J774A.1巨噬细胞分4组(n=6):非特异性siRNA(Scr-siRNA)组(S组)、Scr-siRNA+LPS/ATP组(S+LPS/ATP组)、TIPE2-siRNA组(T组)和TIPE2-siRNA+LPS/ATP组(T+LPS/ATP组).各组分别加入相应的siRNA和Lipofectamine2000转染试剂,转染24~48 h,然后S+LPS/ATP组和T+LPS/ATP组加入LPS 1.0 μg/ml,孵育5h后再加入ATP 5.0mmol/L孵育1h.收集细胞,采用Western blot法检测TIPE2、caspase-11、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和caspase-1表达;收集上清液,测定LDH和MPO活性,采用ELISA法检测IL-1β和IL-18浓度.结果 与S组比较,S+LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1的表达上调,上清液LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05).与T组比较,T+LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1表达上调,上清液中LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05).与S+LPS/ATP组比较,T+LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1表达上调,上清液LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05).结论 TIPE2可通过下调caspase-11表达,抑制小鼠巨噬细胞焦亡.

作者:孔倩;袁敏;赵桂华;段薇娜;冷燕;邱珍;黄琴;吴晓静

来源:中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 8期

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作者:
孔倩;袁敏;赵桂华;段薇娜;冷燕;邱珍;黄琴;吴晓静
来源:
中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 8期
标签:
细胞焦亡 巨噬细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 TIPE2 Pyroptosis Macrophages Caspases TIPE2
目的 评价小鼠巨噬细胞焦亡时肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2 (TIPE2)与caspase-11的关系.方法 采用随机数字表法将小鼠J774A.1巨噬细胞分4组(n=6):非特异性siRNA(Scr-siRNA)组(S组)、Scr-siRNA+LPS/ATP组(S+LPS/ATP组)、TIPE2-siRNA组(T组)和TIPE2-siRNA+LPS/ATP组(T+LPS/ATP组).各组分别加入相应的siRNA和Lipofectamine2000转染试剂,转染24~48 h,然后S+LPS/ATP组和T+LPS/ATP组加入LPS 1.0 μg/ml,孵育5h后再加入ATP 5.0mmol/L孵育1h.收集细胞,采用Western blot法检测TIPE2、caspase-11、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和caspase-1表达;收集上清液,测定LDH和MPO活性,采用ELISA法检测IL-1β和IL-18浓度.结果 与S组比较,S+LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1的表达上调,上清液LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05).与T组比较,T+LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1表达上调,上清液中LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05).与S+LPS/ATP组比较,T+LPS/ATP组细胞TIPE2表达下调,caspase-11、NLRP3和caspase-1表达上调,上清液LDH和MPO活性、IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05).结论 TIPE2可通过下调caspase-11表达,抑制小鼠巨噬细胞焦亡.