目的 通过降低心肌细胞培养基中葡萄糖浓度,观察不同降糖速率下,细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路抑制前后心肌细胞凋亡程度、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的变化,探索降糖速率对心肌细胞损伤程度及其炎性分泌功能的影响及机制.方法 原代培养并鉴定Wistar乳鼠心肌细胞,在葡萄糖浓度为25 mmol/L培养基中培养72 h后,降低培养基浓度.根据培养基中葡萄糖浓度将细胞随机分为5组,即:A组为对照组,B、C、D、E组为实验组,A组维持25 mmol/L葡萄糖浓度不变,B组葡萄糖浓度调整为20mmol/L(降糖速率为5 mmol/L),C组葡萄糖浓度调整为15 mmol/L(降糖速率为10 mmol/L),D组葡萄糖浓度调整为10 mmol/L(降糖速率为15 mmol/L),E组葡萄糖浓度调整为5 mmol/L(降糖速率为20mmol/L),分别于调整葡萄糖浓度后3、24、48 h采用细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞存活率;Annexin V-PI染色后,流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡情况;ELISA方法检测TNF-α水平;Western印迹法测定ERK1/2蛋白及其磷酸化水平.将U0126加入5组中,重复上述方法检测心肌细胞凋亡程度、TNF-α表达的变化.结果 不同降糖速率组,同一时间点,以A组为对照组,B组心肌细胞存活率增高,而C、D、E组逐渐降低(P＜0.05),B、C、D组TNF-α浓度逐渐升高,E组降低(P＜0.01).培养24 h

作者：吴伟华；王月影；王明丽；夏静；孙振杰；于江波；匡洪宇

来源：中华内分泌代谢杂志 2014 年 30卷 11期