目的:探讨hTERT基因的两端部分硫代修饰反义寡核苷酸(AS PS-ODN)抑制前列腺癌细胞PC3端粒酶活性后,肿瘤坏死因子α(TNF-α)对PC3凋亡的增敏作用.方法:采用端粒重复序列扩增法及TRAP-PCR-ELISA法检测前列腺癌细胞的端粒酶活性;采用MTF比色试验观察hTERT AS PS-ODN与TNF-α共同作用对前列腺癌细胞PC3生长活力的影响;倒置显微镜观察凋亡细胞的形态变化;通过流式细胞仪测定凋亡细胞的百分率.结果:hTERT AS PS-ODN作用于PC3细胞48 h,其端粒酶活性下降,作用72 h,其端粒酶活性受到抑制,与正义寡核苷酸组及空白对照组相比差异有显著性(P<0.05).hTERT AS PS-ODN作用于PC3细胞后加入TNF-α作用48 h,PC3细胞的抑制率与对照组、S PS-ODN组、AS PS-ODN组、TNF-α组及S PS-ODN+TNF-α组相比有统计学差异(P<0.01).hTERT AS PS-ODN作用于PC3细胞后加入TNF-α作用48 h,细胞出现典型的凋亡形态变化.hTERT ASPS-ODN作用于PC3细胞后加入4μg/ml TNF-α作用48 h,凋亡细胞的百分率分别与对照组、S PS-ODN组、AS PS-ODN组、TNF-α组及S PS-ODN+TNF-α组相比差异有显著性(P<0.05).结论:hTERT AS PS-ODN能降低前列腺癌细胞PC3端粒酶活性;hTERT基因反义核酸对TNF-α诱导前列腺癌细胞PC3凋亡有增敏作用.
作者:高晓东;陈一戎
来源:中华男科学杂志 2007 年 13卷 8期