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目的:探讨RhoA/Rock信号传导通路在前列腺癌形成过程中的可能作用;研究Rock蛋白抑制剂法舒地尔潜在抗肿瘤侵袭、迁移和促凋亡的作用. 方法:分别用5、10、20、40、80、160 μmol/L浓度的法舒地尔作用于前列腺癌PC3、DU145细胞24 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,并计算其IC50,取法舒地尔IC50的1/4作为给药剂量用于进一步研究.免疫细胞化学法检测法舒地尔对PC3、DU145细胞RhoA、Rock I、RockⅡ蛋白表达的影响;Western印迹检测法舒地尔对PC3、DU145细胞RhoA总蛋白、RhoA膜蛋白、Rock I、RockⅡ蛋白表达的影响;通过Transwell、划痕实验、流式细胞术评估细胞的侵袭、迁移、凋亡情况. 结果:随着法舒地尔作用浓度的增加,对PC3、DU145的抑制率分别从(9.29 ±1.23)%、(7.59 ±1.54)%增加到(81.37 ±3.97)%、(76.53 ±2.67)%,呈一定剂量依赖性(P均<0.05);细胞迁移实验中实验组穿入下室的PC3、DU145细胞为(39.2±8.4)个和(34.2±6.7)个,阴性对照组分别为(116.8 ±9.3)和(112.5 +10.8)个,差异有统计学意义(P均<0.05);划痕实验结果显示实验组PC3、DU145细胞24 h划痕愈合率为(37.26±1.17)%和(32.38 ±2.73)%,阴性对照组愈合率为(78.12±4.16)%和(69.47 ±6.71)%(P均<0.05);Annexin V-FITC/PI双染色法的结果显示,

作者:高庆强;陈海;陈赟;徐志鹏;朱磊磊;余文;韩友峰;戴玉田

来源:中华男科学杂志 2016 年 22卷 6期

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作者:
高庆强;陈海;陈赟;徐志鹏;朱磊磊;余文;韩友峰;戴玉田
来源:
中华男科学杂志 2016 年 22卷 6期
标签:
前列腺癌 RhoA/Rock通路 法舒地尔 侵袭 凋亡 PC3 DU145 prostate cancer RhoA/Rock pathway fasudil invasion apoptosis PC3 DU145
目的:探讨RhoA/Rock信号传导通路在前列腺癌形成过程中的可能作用;研究Rock蛋白抑制剂法舒地尔潜在抗肿瘤侵袭、迁移和促凋亡的作用. 方法:分别用5、10、20、40、80、160 μmol/L浓度的法舒地尔作用于前列腺癌PC3、DU145细胞24 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,并计算其IC50,取法舒地尔IC50的1/4作为给药剂量用于进一步研究.免疫细胞化学法检测法舒地尔对PC3、DU145细胞RhoA、Rock I、RockⅡ蛋白表达的影响;Western印迹检测法舒地尔对PC3、DU145细胞RhoA总蛋白、RhoA膜蛋白、Rock I、RockⅡ蛋白表达的影响;通过Transwell、划痕实验、流式细胞术评估细胞的侵袭、迁移、凋亡情况. 结果:随着法舒地尔作用浓度的增加,对PC3、DU145的抑制率分别从(9.29 ±1.23)%、(7.59 ±1.54)%增加到(81.37 ±3.97)%、(76.53 ±2.67)%,呈一定剂量依赖性(P均<0.05);细胞迁移实验中实验组穿入下室的PC3、DU145细胞为(39.2±8.4)个和(34.2±6.7)个,阴性对照组分别为(116.8 ±9.3)和(112.5 +10.8)个,差异有统计学意义(P均<0.05);划痕实验结果显示实验组PC3、DU145细胞24 h划痕愈合率为(37.26±1.17)%和(32.38 ±2.73)%,阴性对照组愈合率为(78.12±4.16)%和(69.47 ±6.71)%(P均<0.05);Annexin V-FITC/PI双染色法的结果显示,