目的 探讨Toll样受体2(TLR2)基因小干扰RNA(siRNA)对体外高氧暴露条件下A549细胞TLR2基因、蛋白表达及其下游信号通路功能的影响.方法 肺泡上皮细胞株A549置于6孔培养板培养,完全随机分为4组:N组(正常培养组)、H组(高氧组)、T组(高氧+ TLR2-siRNA转染组,转染化学合成TLR2-siRNA)和C组(高氧+阴性对照siRNA转染组,转染化学合成含对照序列的阴性对照-siRNA).运用脂质体转染技术介导化学合成siRNA转染,其中H组、T组和C组细胞高氧培养6h后,流式细胞术检测转染后A549细胞5-羧基荧光素双醋酸盐的表达率,实时定量荧光聚合酶链反应方法检测各组A549细胞TLR2mRNA的表达水平,流式细胞术方法检测各组A549细胞TLR2蛋白表达变化,凝胶电泳迁移率实验检测各组细胞核因子κB核转录水平,酶联免疫吸附测定方法检测各组上清液中白细胞介素6(IL-6)和IL-8含量.结果 转染后A549细胞5-羧基荧光素双醋酸盐的表达率为(92.3±9.6)％;经高氧处理后,H组和C组的TLR2 mRNA、TLR2蛋白水平、核因子κB核转录水平较N组均明显上调[(1.68 ±0.02)、(1.52±0.06)比(1.26±0.02),(9.1±0.8)、(7.8±1.4)比(5.9±2.8),(484 ±64)、(378 ±38)比(46±3)](P＜0.05),各组上清液IL-6、IL-8含量较N组也明显升高(P＜0.05);而T组TLR2mRNA表达(0.87 ±0.0

作者：黄栋；方芳；许峰

来源：中国医药 2014 年 9卷 1期