目的从尖锐湿疣皮损标本中扩增出人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定.方法用PCR法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV11 E7蛋白基因,与pGEX-6P-1载体连接成重组表达质粒pGEX-6P-1/E7;重组质粒转入BL21大肠杆菌,经诱导表达融合蛋白GST-E7;该蛋白经剪刀酶切除GST,Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测鉴定.结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pGEX-6P-1/E7成功构建,诱导后高表达GST-E7融合蛋白并得到纯化,蛋白质印迹证实表达蛋白为E7蛋白.结论获得高表达、高纯度的HPV11E7蛋白,为该蛋白的功能及免疫学分析及尖锐湿疣疫苗研究打下了基础.
作者：王飞；毕志刚；王群；李光富；王新军；张兆松
来源：中华皮肤科杂志 2004 年 37卷 7期
