目的 研究小干扰RNA(siRNA)在体外抑制2型单纯疱疹病毒(HSV-2)的作用.方法 根据HSV-2 VP16和DNA聚合酶基因序列设计、合成siRNA.采用病毒产量减少实验测定siRNA对病毒复制的抑制,在预防性作用研究中,24孔板Vero细胞转染siRNA,4h后换液并接种HSV-2病毒(0.02～0.05 PFU/细胞)；在治疗性作用研究中,24孔板Vero细胞接种HSV-2,1h后转染siRNA.荧光定量RTPCR测定siRNA对病毒靶基因mRNA水平的影响.结果 分别针对HSV-2 VP16基因及DNA聚合酶基因设计的siRNA——VP2-1和DP2-1,在预防性及治疗性作用研究中均能有效抑制病毒复制,使病毒滴度降低约1个log10.siRNA VP2-1使病毒VP16 mRNA的水平在感染后6h和12 h分别降低58.6％和79.5％,而siRNA DP2-1使病毒DNA多聚酶的mRNA水平分别降低59.8％和77.4％.结论 HSV-2 VP16和DNA聚合酶基因的siRNA体外能有效抑制HSV-2复制,VP16和DNA多聚酶基因可以作为RNA干扰抑制HSV病毒复制的靶基因.
作者：张云青；赖维；谢淑霞；关蕾；李欢；李刚
来源：中华皮肤科杂志 2011 年 44卷 11期
