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目的 探讨补体受体3(CR3)在小鼠巨噬细胞识别马尔尼菲青霉中的作用.方法 以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为靶细胞,分别与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞在37℃,5% CO2培养箱中共同培养1h后,逆转录PCR检测CR3 mRNA的表达,Western印迹检测CR3蛋白的表达,流式细胞仪检测吞噬率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清中细胞因子水平.siRNA靶向下调巨噬细胞CR3的表达后与马尔尼菲青霉灭活分生孢子共培养,按照前述方法检测吞噬率及各细胞因子水平.采用SPSS16.0统计软件进行单因素方差分析(ANOVA)检测各组间指标差异.结果 RAW264.7细胞与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞共培养后,四组之间比较,CR3 mRNA、蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05),吞噬率分别为95.14%、89.56%、91.03%、90.78%,各组之间差异无统计学意义(P>0.05);共培养后,白介素(IL)2、干扰素(IFN)γ等Th1型,IL-4、IL-10等Th2型细胞因子均呈不同程度升高,但四个共培养组之间差异无统计学意义(P>0.05).siRNA靶向下调CR3表达后,RAW264.7细胞与马尔尼菲青霉共培养,其对马尔尼菲青霉的吞噬率下降为10.89%,与未干扰组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同时,巨噬细胞分泌细胞因子

作者:胡永轩;张军民;鲁莎;李希清;梁宇恒;鲁长明;席丽艳

来源:中华皮肤科杂志 2013 年 46卷 8期

知识库介绍

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胡永轩;张军民;鲁莎;李希清;梁宇恒;鲁长明;席丽艳
来源:
中华皮肤科杂志 2013 年 46卷 8期
标签:
巨噬细胞 马尔尼菲青霉 受体,补体 疾病模型,动物 Macrophages Penicillium marneffei Receptors,complement Disease models,animal
目的 探讨补体受体3(CR3)在小鼠巨噬细胞识别马尔尼菲青霉中的作用.方法 以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为靶细胞,分别与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞在37℃,5% CO2培养箱中共同培养1h后,逆转录PCR检测CR3 mRNA的表达,Western印迹检测CR3蛋白的表达,流式细胞仪检测吞噬率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清中细胞因子水平.siRNA靶向下调巨噬细胞CR3的表达后与马尔尼菲青霉灭活分生孢子共培养,按照前述方法检测吞噬率及各细胞因子水平.采用SPSS16.0统计软件进行单因素方差分析(ANOVA)检测各组间指标差异.结果 RAW264.7细胞与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞共培养后,四组之间比较,CR3 mRNA、蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05),吞噬率分别为95.14%、89.56%、91.03%、90.78%,各组之间差异无统计学意义(P>0.05);共培养后,白介素(IL)2、干扰素(IFN)γ等Th1型,IL-4、IL-10等Th2型细胞因子均呈不同程度升高,但四个共培养组之间差异无统计学意义(P>0.05).siRNA靶向下调CR3表达后,RAW264.7细胞与马尔尼菲青霉共培养,其对马尔尼菲青霉的吞噬率下降为10.89%,与未干扰组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同时,巨噬细胞分泌细胞因子