目的 构建朗格汉斯细胞特异性C型凝集素受体Langerin体外细胞表达模型.方法 PCR方法获得Langerin分子的cDNA,克隆入真核绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-C1(EGFP位于Langerin的N末端),转染人肾胚细胞癌HEK 293T细胞后,激光共聚焦显微镜检测EGFP-Langerin融合蛋白的细胞表达情况,流式细胞仪检测Langerin受体的表达,并进一步检测转染表达的Langerin受体对尘螨抗原(nDerp 2)的识别和内吞情况.结果 构建的荧光融合蛋白重组表达质粒转染HEK 293T细胞后,经PCR及Western印迹检测证明Langerin转染及表达成功.重组表达质粒转染HEK293T细胞后,经流式细胞仪检测转染Langerin融合质粒的HEK293T细胞的Langerin受体表达率较转染前增多约43％,经激光共聚焦显微镜检测显示绿色荧光标记的Langerin成功表达,并可与红色荧光素标记的尘螨抗原(nDerp 2)结合,将nDer p 2内吞入细胞内.结论 构建的EGFP-Langerin融合蛋白在HEK293T细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布,具有结合、内吞过敏原功能.
作者：张晓宁；张宇；罗阳；李巍；姚煦
来源：中华皮肤科杂志 2015 年 48卷 6期
