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目的 探讨咖啡酸衍生物WSY6对过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用和潜在分子机制.方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,分为对照组(不做任何处理)、H2O2组(1 mmol/LH2O2处理)和6.25、12.5、25 μmol/LWSY6组(分别用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6预处理1h后再用1 mmol/L H2O2处理1h).继续培养24 h后,用MTS法测定黑素细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放量.部分黑素细胞分为抑制剂组(用p38抑制剂预处理1h,再用1 mmol/LH2O2处理1h)和H2O2组(直接用1 mmol/LH2O2处理1h),处理完成后继续培养24 h,用试剂盒检测LDH的释放量.部分黑素细胞用25 μmol/L WSY6预处理1、2、4h后,再用H2O2处理1h,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;部分黑素细胞用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6处理1h后,再用H2O2处理1h,Western印迹法检测细胞色素C(cyto-c)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9和磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)及c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达.结果 与对照组相比,H2O2组黑素细胞存活率明显降低(29.22%±1.31%,P<0.05),细胞内LDH释放量增加(47.19%±4.85%,P<0.05),ROS水平明显升高(18.37±1.59,P<0.05),caspase-3和caspase-9的表达亦均升

作者:金嵘;祝逸平;林福全;刘东银;傅丽芳;许爱娥

来源:中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 12期

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作者:
金嵘;祝逸平;林福全;刘东银;傅丽芳;许爱娥
来源:
中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 12期
标签:
白癜风 黑素细胞 氧化性应激 咖啡酸 乳酸脱氢酶类 细胞外信号调节MAP激酶类 Vitiligo Melanocytes Oxidative stress Caffeic acid Lactate dehydrogenases Extracellular signal-regulated MAP kinases
目的 探讨咖啡酸衍生物WSY6对过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用和潜在分子机制.方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,分为对照组(不做任何处理)、H2O2组(1 mmol/LH2O2处理)和6.25、12.5、25 μmol/LWSY6组(分别用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6预处理1h后再用1 mmol/L H2O2处理1h).继续培养24 h后,用MTS法测定黑素细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放量.部分黑素细胞分为抑制剂组(用p38抑制剂预处理1h,再用1 mmol/LH2O2处理1h)和H2O2组(直接用1 mmol/LH2O2处理1h),处理完成后继续培养24 h,用试剂盒检测LDH的释放量.部分黑素细胞用25 μmol/L WSY6预处理1、2、4h后,再用H2O2处理1h,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;部分黑素细胞用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6处理1h后,再用H2O2处理1h,Western印迹法检测细胞色素C(cyto-c)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9和磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)及c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达.结果 与对照组相比,H2O2组黑素细胞存活率明显降低(29.22%±1.31%,P<0.05),细胞内LDH释放量增加(47.19%±4.85%,P<0.05),ROS水平明显升高(18.37±1.59,P<0.05),caspase-3和caspase-9的表达亦均升