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目的 研究低浓度过氧化氢(H2O2)处理对人黑素细胞黏附功能及自噬水平的影响,并筛选自噬相关lncRNA.方法 从健康男性包皮环切术后获得的皮肤组织中分离、培养黑素细胞.对数生长期黑素细胞分为对照组(无H2O2处理)、H2O2组(400μmol/L H2O2处理)和H2O2+NAC组(4 mmol/L NAC预处理细胞2h,然后加入400 μmol/L H2O2).处理5d后,用免疫荧光检测上述各组黑素细胞E-钙黏素、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及p62表达,透射电镜观察细胞结构及自噬体,Western印迹法检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达,运用基因芯片技术筛选自噬相关lncRNA.采用Graphpad Prism 6软件进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,并用Tukey检验进行两两间的多重比较.结果 共聚焦显微镜下,与对照组和H2O2+ NAC组相比,H2O2组黑素细胞E-钙黏素及LC3荧光强度均明显下降,而p62荧光强度增高,且电镜下H2O2组黑素细胞内自噬体数量减少.Western印迹结果显示,H2O2处理组黑素细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(0.604±0.012)显著低于对照组(1.200±0.081,q=7.718,P<0.01)及H2O2+NAC组(1.017±0.062,q=5.076,P<0.05),同时其p62/β肌动蛋白值(0.881±0.079)显著高于对照组(0.456±0.121,q=4.847,P<0.05)及H2O2+NAC组(0.492±0.049,q=4.439,P<0.05).H2O2+NAC组与对照组的LC

作者:石家绮;李雪;孙利;赵文娥;丁书红;侯晓媛;修艳燕;鲁严

来源:中华皮肤科杂志 2019 年 52卷 6期

知识库介绍

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作者:
石家绮;李雪;孙利;赵文娥;丁书红;侯晓媛;修艳燕;鲁严
来源:
中华皮肤科杂志 2019 年 52卷 6期
标签:
白癜风 黑素细胞 细胞黏附 自噬 氧化性应激 过氧化氢 微管相关蛋白质类 E-钙黏素 长链非编码RNA Vitiligo Melanocytes Cell adhesion Autophagy Oxidative stress Hydrogen peroxide Microtubule-associated proteins E-cadherin LncRNA
目的 研究低浓度过氧化氢(H2O2)处理对人黑素细胞黏附功能及自噬水平的影响,并筛选自噬相关lncRNA.方法 从健康男性包皮环切术后获得的皮肤组织中分离、培养黑素细胞.对数生长期黑素细胞分为对照组(无H2O2处理)、H2O2组(400μmol/L H2O2处理)和H2O2+NAC组(4 mmol/L NAC预处理细胞2h,然后加入400 μmol/L H2O2).处理5d后,用免疫荧光检测上述各组黑素细胞E-钙黏素、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及p62表达,透射电镜观察细胞结构及自噬体,Western印迹法检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达,运用基因芯片技术筛选自噬相关lncRNA.采用Graphpad Prism 6软件进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,并用Tukey检验进行两两间的多重比较.结果 共聚焦显微镜下,与对照组和H2O2+ NAC组相比,H2O2组黑素细胞E-钙黏素及LC3荧光强度均明显下降,而p62荧光强度增高,且电镜下H2O2组黑素细胞内自噬体数量减少.Western印迹结果显示,H2O2处理组黑素细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(0.604±0.012)显著低于对照组(1.200±0.081,q=7.718,P<0.01)及H2O2+NAC组(1.017±0.062,q=5.076,P<0.05),同时其p62/β肌动蛋白值(0.881±0.079)显著高于对照组(0.456±0.121,q=4.847,P<0.05)及H2O2+NAC组(0.492±0.049,q=4.439,P<0.05).H2O2+NAC组与对照组的LC