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目的 分析核蛋白14 (NOP14)对黑素瘤血管形成的影响.方法 收集2016年1月至2018年12月在广州市第一人民医院经病理确诊的40例黑素瘤患者的黑素瘤组织,免疫组化检测NOP14和CD31[以微血管密度(MVD)表示]的表达.将黑素瘤细胞A375和SK-MEL-1细胞分别分为4组,分别转染空载体(空载体组)、NOP14过表达载体(NOP14组)、靶向NOP14的siRNA(siNOP14组)和阴性对照siRNA(siNC组).荧光定量PCR和Western印迹检测各组NOP14 mRNA和蛋白的表达,Western印迹和ELISA检测细胞及其培养基中血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)的表达.利用Transwell小室构建以上各组A375、SK-MEL-1细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养模型,利用CCK8、Transwell小室和Matrigel血管拟态实验检测共培养后各组HUVEC的增殖、迁移、侵袭和管腔形成能力.采用线性回归模型分析黑素瘤组织中NOP14表达水平与MVD的关系,多因素方差分析检验细胞增殖活性的差异,其余实验指标的两组之间比较采用独立样本t检验.结果 NOP14高表达组(20例)黑素瘤组织MVD为44±13,中表达组(17例)为58± 16,低表达组(3例)为62± 11,且NOP14表达和MVD呈负相关(r=-0.525,P=0.017).与空载体组相比,NOP14组A375和SK-MEL-1细胞及培养基中VEGF和VEGFR的表达水平均显著降低(

作者:李璟蓉;赵瑞;王康玮;方锐华

来源:中华皮肤科杂志 2020 年 53卷 3期

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作者:
李璟蓉;赵瑞;王康玮;方锐华
来源:
中华皮肤科杂志 2020 年 53卷 3期
标签:
痣和黑素瘤 黑色素瘤,实验性 核蛋白质类 血管生成抑制剂 细胞增殖 细胞运动 核蛋白14 Nevi and melanomas Melanoma,experimental Nuclear proteins Angiogenesis inhibitors Cell proliferation Cell movement Nucleolar protein 14
目的 分析核蛋白14 (NOP14)对黑素瘤血管形成的影响.方法 收集2016年1月至2018年12月在广州市第一人民医院经病理确诊的40例黑素瘤患者的黑素瘤组织,免疫组化检测NOP14和CD31[以微血管密度(MVD)表示]的表达.将黑素瘤细胞A375和SK-MEL-1细胞分别分为4组,分别转染空载体(空载体组)、NOP14过表达载体(NOP14组)、靶向NOP14的siRNA(siNOP14组)和阴性对照siRNA(siNC组).荧光定量PCR和Western印迹检测各组NOP14 mRNA和蛋白的表达,Western印迹和ELISA检测细胞及其培养基中血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)的表达.利用Transwell小室构建以上各组A375、SK-MEL-1细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养模型,利用CCK8、Transwell小室和Matrigel血管拟态实验检测共培养后各组HUVEC的增殖、迁移、侵袭和管腔形成能力.采用线性回归模型分析黑素瘤组织中NOP14表达水平与MVD的关系,多因素方差分析检验细胞增殖活性的差异,其余实验指标的两组之间比较采用独立样本t检验.结果 NOP14高表达组(20例)黑素瘤组织MVD为44±13,中表达组(17例)为58± 16,低表达组(3例)为62± 11,且NOP14表达和MVD呈负相关(r=-0.525,P=0.017).与空载体组相比,NOP14组A375和SK-MEL-1细胞及培养基中VEGF和VEGFR的表达水平均显著降低(