目的观察血管内皮生长因子(VEGF)过度表达对恶性黑素瘤细胞株A375增殖的影响,研究一氧化氮在其中所起的作用,以明确VEGF的作用机制.方法 VEGF165 cDNA经电穿孔转染A375细胞,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫酶联吸附实验(ELISA)检测转染前后A375细胞VEGF的mRNA和蛋白表达,应用细胞计数和MTT法比较转染组和对照组A375细胞增殖能力和活性,用硝酸还原酶法检测A375细胞转染前后培养上清中一氧化氮含量,并应用一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)观察A375细胞转染VEGF165 cDNA后的增殖情况.结果转染VEGF165 cDNA后48 h、72 h和96 h A375细胞VEGF mRNA分别为0.48±0.05,1.27±0.07,1.24±0.01,较转染前的0.24±0.05明显增加(P<0.05);VEGF蛋白表达和一氧化氮水平也呈相同的变化趋势(P<0.05);转染VEGF165 cDNA后A375细胞增殖能力较未转染组明显增强(P<0.05);L-NAME可剂量依赖性地抑制转染后的A375细胞增殖活性(P<0.01).结论内源性的一氧化氮在VEGF促进A375细胞增殖中起重要作用.
作者：陶娟；涂亚庭
来源：中国皮肤性病学杂志 2004 年 18卷 5期
