目的 通过构建乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase,LDH-A)shRNA并转染PANC-1细胞,分析其对胰腺癌细胞生物学特性的影响.方法 构建3条LDH-A shRNA质粒,脂质体转染质粒至PANC-1细胞中,实时荧光定量PCR法检测不同质粒转染后LDH-A mRNA的表达变化.将抑制效率最高的shRNA质粒-3转染PANC-1细胞,MTT法检测转染前后细胞增殖的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.RT-PCR检测LDH-A表达以及酶化学染色检测转染前后LDH活性的变化.结果 3种LDH-A shRNA质粒转染胰腺癌细胞后,LDH-A shRNA质粒.3的2-△△Ct值为(0.47±0.02),较正常细胞(0.71±0.01)小,存在抑制作用,且抑制效率较高.PANC-1细胞在转染shRNA质粒-3后12 h转染组吸光度值显著低于对照组,细胞出现增殖抑制,24、36、48和72 h,转染组的吸光度值均显著低于对照组(P<0.01).转染质粒组细胞凋亡也明显增高,其凋亡率达到61.74
作者：张树华；熊炯炘；王春友
来源：中华普通外科杂志 2009 年 24卷 7期
