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目的研究将外源基因转入移植心脏,进行基因治疗的可行性.方法建立小鼠异位心脏移植模型,建立经冠脉循环系统灌注技术.将12只BAIB/c近交系小鼠随机分为转基因组和空白对照组,每组各6只(供、受者各3只).转基因组经冠脉循环系统将携带报告基因-半乳糖苷酶基因(Lac-Z)的质粒载体(PSV-β-gal)/旨质体(DOSPER)混合物灌注入供心,而后进行异位心脏移植;对照组则灌注生理盐水.术后3 d获取供心,作冰冻切片,经X-gal组织化学染色检测Lac-Z基因的转染和表达情况.结果转基因组的3例供心都检测到Lac-Z基因的表达;其中有2例Lac-Z基因表达位于心室壁中层的心肌内,1例其表达位于心内膜下的心肌内.而在对照组则没有检测到Lac-Z基因.结论以冠脉循环系统灌注的方式将质粒载体/旨质体的混合物灌注入供心,使外源基因转入供心并表达是可行的.

作者:倪一鸣;冯强;梁宏立

来源:中华器官移植杂志 2004 年 25卷 2期

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作者:
倪一鸣;冯强;梁宏立
来源:
中华器官移植杂志 2004 年 25卷 2期
标签:
心脏移植 小鼠,转基因
目的研究将外源基因转入移植心脏,进行基因治疗的可行性.方法建立小鼠异位心脏移植模型,建立经冠脉循环系统灌注技术.将12只BAIB/c近交系小鼠随机分为转基因组和空白对照组,每组各6只(供、受者各3只).转基因组经冠脉循环系统将携带报告基因-半乳糖苷酶基因(Lac-Z)的质粒载体(PSV-β-gal)/旨质体(DOSPER)混合物灌注入供心,而后进行异位心脏移植;对照组则灌注生理盐水.术后3 d获取供心,作冰冻切片,经X-gal组织化学染色检测Lac-Z基因的转染和表达情况.结果转基因组的3例供心都检测到Lac-Z基因的表达;其中有2例Lac-Z基因表达位于心室壁中层的心肌内,1例其表达位于心内膜下的心肌内.而在对照组则没有检测到Lac-Z基因.结论以冠脉循环系统灌注的方式将质粒载体/旨质体的混合物灌注入供心,使外源基因转入供心并表达是可行的.