目的 研究DNA聚合酶θ(POLQ)在MCF-7乳腺癌细胞系中的表达及其对该细胞系体外增殖和早期凋亡的影响.方法 经脂质体LipofectamineTM2000介导将POLQ-siRNA转染入MCF-7乳腺癌细胞系中,MCF-7细胞被分为POLQ-siRNA组、Control-siRNA组和空白对照组;用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)和Western blot分别从基因和蛋白水平检测POLQ表达率的变化;利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;用流式细胞术判断转染前后细胞周期和凋亡率的改变.数据采用单因素方差分析和重复测量数据的方差分析进行统计.结果 POLQ在MCF-7乳腺癌细胞系中高表达,其相对分子质量(Mr)>250 000,同时在Mr约170 000和100 000处容易检测到明显的条带.POLQ-siRNA组细胞POLQ mRNA平均表达量是空白对照组的(0.12±0.01)倍(P=0.00),POLQ蛋白表达率为(32.0±0.7)
作者:李学孝;吴爱国;胡斌;王梦川;纪术峰;邵国利;吴凯
来源:中华乳腺病杂志(电子版) 2011 年 05卷 5期