目的:明确CD97 免疫表位CD97EGF和CD97Stalk对乳腺癌细胞生物学行为的影响.方法:采用siCatchTM siRNA design 软件设计CD97EGF 小干扰RNA(siRNA)和CD97Stalk siRNA 并转染CD97 高表达乳腺癌细胞株MDA-MB231;蛋白质印迹法筛选高敏感CD97EGF siRNA 和CD97Stalk siRNA.倒置显微镜观察和计数siRNA 转染后乳腺癌细胞的生长;四唑盐(MTT)法检测siRNA 转染后乳腺癌细胞的增殖活性;划痕试验和Transwell 试验观察siRNA 转染对乳腺癌细胞迁移和侵袭力的影响;TUNEL 法检测siRNA 转染对乳腺癌细胞凋亡的影响;流式细胞术检测siRNA 转染对乳腺癌细胞周期的影响.结果:siRNA 转染后,乳腺癌细胞的生长数量和增殖活性明显低于对照组,且CD97Stalk siRNA 组的变化较CD97EGF siRNA 组更为显著(均P <0.05);划痕试验结果显示,siRNA 转染组乳腺癌细胞的移动速率明显慢于对照组(均P <0.01),且CD97Stalk siRNA 对乳腺癌细胞移动速率的影响明显大于CD97EGF siRNA(P <0.05);Transwell 试验结果显示,siRNA 转染组迁移过膜的细胞数量明显少于对照组,且以CD97Stalk siRNA 组减少最为显著(均P <0.05).siRNA 转染对乳腺癌细胞凋亡率的影响不明显,但siRNA 转染组中G0 /G1 期细胞所占比例较对照组明显减小,而S 期细胞所占的比例明显增加,且CD9
作者:田华;陈洋;赵建刚;刘达人;梁刚;龚谓华;陈力;吴育连
来源:浙江大学学报(医学版) 2017 年 46卷 4期