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目的 通过建立小鼠慢性睡眠剥夺模型,观察长期睡眠剥夺对小鼠学习记忆以及对神经元细胞自噬和凋亡的影响.方法 C57BL/6小鼠20只,应用随机数字表进行随机分组,睡眠剥夺组和对照组各10只.采用改良的多平台法对睡眠剥夺组小鼠建立慢性睡眠剥夺模型,2个月后通过IntelliCage全自动动物行为学检测系统检测小鼠的学习记忆能力,蛋白免疫印迹法检测微管相关蛋白-1轻链3 (LC3)-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达,采用激光共聚焦显微镜观察海马和皮质神经元内的自噬小体,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位末端标记法(TUNEL)染色观察海马和皮质神经元凋亡.结果 与对照组相比,睡眠剥夺组小鼠表现出明显的空间学习能力下降,其错误的来访率明显增高;此外,睡眠剥夺组小鼠脑组织LC3-Ⅱ(睡眠剥夺组1.681±0.186,对照组1.125±0.048,t=2.892,P=0.027 6)和Beclin-1(睡眠剥夺组1.144±0.048,对照组1.006±0.017,t=2.721,P=0.018 6)蛋白表达显著升高,海马和皮质脑区LC3阳性细胞数增多(海马睡眠剥夺组1.665±0.153,对照组0.819 ±0.071,t=5.024,P=0.002 4;皮质睡眠剥夺组1.925±0.175,对照组1.195±0.111,t=3.521,P=0.012 5);同时,TUNEL染色显示睡眠剥夺组小鼠海马和皮质凋亡阳性细胞百分比(%)显著升高(海马睡眠剥夺组47.24 ±4.15,对照组

作者:邱红艳;李崧;乐卫东

来源:中华神经科杂志 2015 年 48卷 7期

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作者:
邱红艳;李崧;乐卫东
来源:
中华神经科杂志 2015 年 48卷 7期
标签:
睡眠剥夺 神经元 自噬 细胞凋亡 记忆障碍 疾病模型,动物 Sleep deprivation Neurons Autophagy Apoptosis Memory disorders Disease models,animal
目的 通过建立小鼠慢性睡眠剥夺模型,观察长期睡眠剥夺对小鼠学习记忆以及对神经元细胞自噬和凋亡的影响.方法 C57BL/6小鼠20只,应用随机数字表进行随机分组,睡眠剥夺组和对照组各10只.采用改良的多平台法对睡眠剥夺组小鼠建立慢性睡眠剥夺模型,2个月后通过IntelliCage全自动动物行为学检测系统检测小鼠的学习记忆能力,蛋白免疫印迹法检测微管相关蛋白-1轻链3 (LC3)-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达,采用激光共聚焦显微镜观察海马和皮质神经元内的自噬小体,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位末端标记法(TUNEL)染色观察海马和皮质神经元凋亡.结果 与对照组相比,睡眠剥夺组小鼠表现出明显的空间学习能力下降,其错误的来访率明显增高;此外,睡眠剥夺组小鼠脑组织LC3-Ⅱ(睡眠剥夺组1.681±0.186,对照组1.125±0.048,t=2.892,P=0.027 6)和Beclin-1(睡眠剥夺组1.144±0.048,对照组1.006±0.017,t=2.721,P=0.018 6)蛋白表达显著升高,海马和皮质脑区LC3阳性细胞数增多(海马睡眠剥夺组1.665±0.153,对照组0.819 ±0.071,t=5.024,P=0.002 4;皮质睡眠剥夺组1.925±0.175,对照组1.195±0.111,t=3.521,P=0.012 5);同时,TUNEL染色显示睡眠剥夺组小鼠海马和皮质凋亡阳性细胞百分比(%)显著升高(海马睡眠剥夺组47.24 ±4.15,对照组