目的:探索哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素在慢性脑缺血中的作用及机制.方法:6 周龄的ICR 小鼠通过右颈总动脉结扎诱导慢性脑缺血模型,采用蛋白质印迹法检测造模后不同时期(1、3、6、24 h,3、7 d,2、4、6 周)小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR 信号通路mTOR、S6K 和S6 蛋白表达及其磷酸化水平.造模24 h 后腹腔注射雷帕霉素(3.0 mg/kg),经Fluoro-Jade B 染色观察细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测mTOR 信号通路的变化和对细胞自噬的影响,并采用Morris 水迷宫和Y 迷宫试验测定小鼠学习记忆功能.结果:模型小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR 信号通路被异常激活,从6 h 开始一直持续到6 周,表现为mTOR、S6K 和S6 蛋白磷酸化增加.雷帕霉素可逆转由慢性脑缺血所致的mTOR 信号通路激活,并显著减少细胞凋亡(146.1 ±16.3与84.5 ±9.6,P <0.05).雷帕霉素还能显著逆转慢性脑缺血所导致的Beclin1和LC3-Ⅱ蛋白的表达.Morris 水迷宫和Y 迷宫试验结果显示,雷帕霉素组较模型组平台潜伏期缩短[(11.1 ±2.3)s 与(8.1 ±1.8)s,P <0.05]、游泳距离延长[(672.8 ±128.5) cm 与(558.2 ±124.9) cm,P <0.05]、穿越平台次数减少(2.8 ±0.9 与5.2 ±0.8,P <0.05)、正确反应率提高[(38.5 ±9.2)

作者：张斌斌；吴美玲；刘露娜；竺杨彬；开洁静；曾玲晖

来源：浙江大学学报（医学版） 2017 年 46卷 4期