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目的 观察miR-15b对人胶质瘤细胞株A172细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其对RAS/MEK/ERK1/2信号通路的作用.方法 合成miR-15b寡聚核甘酸拟似物(miR-15b mimics)转染A172细胞株,应用噻唑蓝细胞增殖试验(MTT)、流式细胞术评价miR-15b对A172细胞增殖和凋亡的作用,以Western blot法检测miR-15b对RAS及其下游信号通路的影响.结果 转染miR-15b mimics后,应用实时定量PCR检测空白对照组、阴性对照组、miR-15b mimics组的△Ct值分别为15.25±1.12、15.92±0.98和10.58±0.87,提示miR-15b在A172细胞中表达水平明显升高.Western blot结果显示,miR-15b mimics可显著抑制RAS、MEK、ERK1/2及pERK1/2蛋白的表达水平(均P<0.05).MTT法检测结果显示,miR-15b mimics转染A172细胞24 h、48 h、72 h后,细胞相对存活率分别为(72.28±6.52)%、(61.86±5.79)%和(59.38±5.97)%;miR-15b mimics组的细胞存活率较空白对照组和阴性对照组明显下降(P<0.05).细胞周期分析发现,miR-15b mimics组细胞G1/G0期为66.84%,miR-15b mimics诱导A172细胞阻滞在G0/G1期.磷脂结合蛋白/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染法检测显示,空白对照组、阴性对照组、miR-15b mimics组的细胞凋亡率分别为(2.7±0.83)%、(2.5±0.81)%和(18.2±1.58)%;miR-15b mi

作者:孙关;桂群峰;万政强;江楠;郭俊

来源:中华神经外科杂志 2015 年 31卷 11期

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作者:
孙关;桂群峰;万政强;江楠;郭俊
来源:
中华神经外科杂志 2015 年 31卷 11期
标签:
神经胶质瘤 细胞增殖 细胞凋亡 miR-15b Glioma Cell proliferation Cell apoptosis miR-15b
目的 观察miR-15b对人胶质瘤细胞株A172细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其对RAS/MEK/ERK1/2信号通路的作用.方法 合成miR-15b寡聚核甘酸拟似物(miR-15b mimics)转染A172细胞株,应用噻唑蓝细胞增殖试验(MTT)、流式细胞术评价miR-15b对A172细胞增殖和凋亡的作用,以Western blot法检测miR-15b对RAS及其下游信号通路的影响.结果 转染miR-15b mimics后,应用实时定量PCR检测空白对照组、阴性对照组、miR-15b mimics组的△Ct值分别为15.25±1.12、15.92±0.98和10.58±0.87,提示miR-15b在A172细胞中表达水平明显升高.Western blot结果显示,miR-15b mimics可显著抑制RAS、MEK、ERK1/2及pERK1/2蛋白的表达水平(均P<0.05).MTT法检测结果显示,miR-15b mimics转染A172细胞24 h、48 h、72 h后,细胞相对存活率分别为(72.28±6.52)%、(61.86±5.79)%和(59.38±5.97)%;miR-15b mimics组的细胞存活率较空白对照组和阴性对照组明显下降(P<0.05).细胞周期分析发现,miR-15b mimics组细胞G1/G0期为66.84%,miR-15b mimics诱导A172细胞阻滞在G0/G1期.磷脂结合蛋白/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染法检测显示,空白对照组、阴性对照组、miR-15b mimics组的细胞凋亡率分别为(2.7±0.83)%、(2.5±0.81)%和(18.2±1.58)%;miR-15b mi