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目的 观察胚胎来源人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)能否抑制体外培养的大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)增殖和炎症因子表达,探讨哪些人源性促炎因子可以诱导hBM-MSCs发挥免疫抑制作用,并观察hBM-MSCs对脑梗死模型大鼠梗死区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和蛋白表达的影响. 方法 将提取的hBM-MSCs和大鼠PBMCs进行共培养,并以在培养基中添加10 μg/mL刀豆蛋白A(ConA)方式激活大鼠PBMCs.(1)实验主要包括hBM-MSCs+PBMCs组、hBM-MSCs+PBMCs+ConA组、PBMCs组、hBM-MSCs组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况.(2)实验主要包括hBM-MSCs+PBMCs+ConA组、PBMCs+ConA组,采用EUSA法检测培养液中TNF-α、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10 (IL-10)的表达水平.(3)实验分为hBM-MSCs+PBMCs(IFN-γ+IL-1 α)组、hBM-MSCs+PBMCs (IFN-γ+IL-1β)组、hBM-MSCs+PBMCs (IFN-γ+TNF-α)组、hBM-MSCs+PBMCs组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况.(4)SD大鼠30只按随机数字表法分为假手术组、对照组(脑缺血后尾静脉给予生理盐水)和hBM-MSCs组(脑缺血后尾静脉给予hBM-MSCs),每组10只.术后3d取材,采用RT-PCR、Western blotting检测脑梗死区TNF-α mRNA和蛋白表达. 结果 (1)与PBMCs组、hBM-MSCs组相比,hBM-MSCs+PBMCs组吸光度值均显著升高,差异均有统

作者:赵春松;邹海强;谢璇;陈凌;王佳茵;关云谦;张愚

来源:中华神经医学杂志 2016 年 15卷 8期

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作者:
赵春松;邹海强;谢璇;陈凌;王佳茵;关云谦;张愚
来源:
中华神经医学杂志 2016 年 15卷 8期
标签:
脑梗死 人骨髓间充质干细胞 单个核细胞 炎症因子 免疫抑制 Cerebral ischemia Human bone marrow mesenchymal stem cell Mononuclear cell Inflammation factor Immune-suppression
目的 观察胚胎来源人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)能否抑制体外培养的大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)增殖和炎症因子表达,探讨哪些人源性促炎因子可以诱导hBM-MSCs发挥免疫抑制作用,并观察hBM-MSCs对脑梗死模型大鼠梗死区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和蛋白表达的影响. 方法 将提取的hBM-MSCs和大鼠PBMCs进行共培养,并以在培养基中添加10 μg/mL刀豆蛋白A(ConA)方式激活大鼠PBMCs.(1)实验主要包括hBM-MSCs+PBMCs组、hBM-MSCs+PBMCs+ConA组、PBMCs组、hBM-MSCs组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况.(2)实验主要包括hBM-MSCs+PBMCs+ConA组、PBMCs+ConA组,采用EUSA法检测培养液中TNF-α、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10 (IL-10)的表达水平.(3)实验分为hBM-MSCs+PBMCs(IFN-γ+IL-1 α)组、hBM-MSCs+PBMCs (IFN-γ+IL-1β)组、hBM-MSCs+PBMCs (IFN-γ+TNF-α)组、hBM-MSCs+PBMCs组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况.(4)SD大鼠30只按随机数字表法分为假手术组、对照组(脑缺血后尾静脉给予生理盐水)和hBM-MSCs组(脑缺血后尾静脉给予hBM-MSCs),每组10只.术后3d取材,采用RT-PCR、Western blotting检测脑梗死区TNF-α mRNA和蛋白表达. 结果 (1)与PBMCs组、hBM-MSCs组相比,hBM-MSCs+PBMCs组吸光度值均显著升高,差异均有统