目的 体外观察不同浓度LPS对人脐带间充质干细胞(hUCMSC)增殖以及凋亡的影响,并探讨可能机制. 方法 取足月剖宫产健康胎儿的脐带组织,采用组织块法体外分离培养hUCMSC,实验选用第3代细胞.按随机数字表法将细胞分为对照组及0.1、1.0、10.0、100.0 μg/mLLPS干预组,各LPS干预组细胞培养液中添加对应浓度的LPS,对照组细胞培养液中不添加LPS.对LPS干预组细胞,刺激12、24、48 h采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(每组每时相点样本数为5),数据以吸光度值表示;刺激24 h采用吖啶橙-溴化乙啶(AO-EB)染色观察细胞凋亡情况(每组样本数为4),并采用流式细胞仪检测细胞凋亡率(每组样本数为5).对照组细胞于相同时相点行相应检测.对数据行单因素方差分析、LSD-t检验. 结果 (1)刺激12h,各组细胞增殖活性无明显差异(t值为-1.67 ~1.33,P值均大于0.05).与对照组比较,0.1、1.0、10.0μg/mL LPS干预组刺激24、48 h细胞增殖活性均明显增高(t值为-13.42 ~17.34,P<0.05或P<0.01),其中以1.0μg/mL LPS干预组最明显;100.0 μg/mL LPS干预组刺激24、48 h细胞增殖活性明显降低(t值分别为8.64、17.34,P值均小于0.01).(2)AO-EB染色显示,对照组和0.1、1.0、10.0μg/mL LPS干预组未见明显细胞凋亡,100.0 μg/mL LPS干预组可见明显细胞凋亡.
作者:侯玉森;柴家科;刘玲英;段红杰;郁永辉;胡泉;褚万立;王一贺;罗红敏
来源:中华烧伤杂志 2014 年 30卷 2期