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目的:探讨微小RNA-205(miR-205)在增生性瘢痕中的表达及作用。方法:采用实验研究方法。(1)收集于2019年10月—2020年1月于北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例,年龄(36±7)岁]的增生性瘢痕组织及同时期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者[男2例、女4例,年龄(38±9)岁]行皮瓣手术后剩余的正常皮肤组织,采用实时荧光定量PCR检测 miR-205和血小板反应蛋白1( TSP-1)的mRNA表达情况。取增生性瘢痕组织,培养3~5代成纤维细胞,用于后续实验。取增生性瘢痕Fb,分成TSP-1+ miR-205对照组、TSP-1+miR-205模拟物组、TSP-1突变+miR-205对照组、TSP-1突变+miR-205模拟物组,分别转染相应的序列。转染后48 h采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达,并计两者比值,以此表示TSP-1的活性。取2批增生性瘢痕Fb,分为miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205抑制物组及miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205模拟物+TSP-1组,分别转染相应的序列,转染后0(即刻)、12、24、36、48 h,用酶标仪检测细胞活力。取2批增生性瘢痕Fb,同细胞活力检测实验进行分组及处理,转染后24 h,行Hoechst 33258染色,观察观察细胞核皱缩情况,以

作者:郭冰玉;姜栋文;回蔷;柴筠;陶凯

来源:中华烧伤杂志 2021 年 37卷 2期

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作者:
郭冰玉;姜栋文;回蔷;柴筠;陶凯
来源:
中华烧伤杂志 2021 年 37卷 2期
标签:
瘢痕 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 微小RNA-205 血小板反应蛋白1 Cicatrix Fibroblasts Cell proliferation Apoptosis microRNA-205 Thrombospondin-1
目的:探讨微小RNA-205(miR-205)在增生性瘢痕中的表达及作用。方法:采用实验研究方法。(1)收集于2019年10月—2020年1月于北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例,年龄(36±7)岁]的增生性瘢痕组织及同时期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者[男2例、女4例,年龄(38±9)岁]行皮瓣手术后剩余的正常皮肤组织,采用实时荧光定量PCR检测 miR-205和血小板反应蛋白1( TSP-1)的mRNA表达情况。取增生性瘢痕组织,培养3~5代成纤维细胞,用于后续实验。取增生性瘢痕Fb,分成TSP-1+ miR-205对照组、TSP-1+miR-205模拟物组、TSP-1突变+miR-205对照组、TSP-1突变+miR-205模拟物组,分别转染相应的序列。转染后48 h采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达,并计两者比值,以此表示TSP-1的活性。取2批增生性瘢痕Fb,分为miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205抑制物组及miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205模拟物+TSP-1组,分别转染相应的序列,转染后0(即刻)、12、24、36、48 h,用酶标仪检测细胞活力。取2批增生性瘢痕Fb,同细胞活力检测实验进行分组及处理,转染后24 h,行Hoechst 33258染色,观察观察细胞核皱缩情况,以